RNA干擾核糖核酸酶抑制因子表達對膀胱癌BIU-87細胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩50頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:構(gòu)建核糖核酸酶抑制因子(RI)基因siRNA干擾質(zhì)粒,并檢測其對人膀胱癌BIU-87細胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響。 方法:設(shè)計并構(gòu)建針對RI基因mRNA的2個特異性siRNA表達載體和1個無同源性的陰性對照載體,通過酶切和DNA測序鑒定載體,再轉(zhuǎn)染BIU-87細胞,通過RT-PCR、western blot和免疫細胞化學檢測干擾的有效性。觀察細胞形態(tài)改變,細胞粘附實驗、劃痕實驗和Transwell法測定細胞粘附、遷移和侵襲能力的變

2、化,分析細胞中基質(zhì)金屬基質(zhì)酶的表達,及用激光共聚焦顯微鏡觀察細胞骨架微絲結(jié)構(gòu)。 結(jié)果:酶切和測序鑒定質(zhì)粒構(gòu)建符合實驗設(shè)計;轉(zhuǎn)入特異性siRNA表達載體后RI蛋白的表達被顯著抑制,對照組未發(fā)生顯著改變;2個干擾實驗組的細胞形態(tài)堆疊嚴重,細胞粘附顯著降低,遷移和侵襲能力顯著增加,基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9顯著提高,細胞骨架微絲聚集,細胞伸展出片狀偽足。 結(jié)論:已成功構(gòu)建RI基因siRNA干擾質(zhì)粒,抑制RI基因的表達

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論