VTN、PLAU和PLAUR基因的功能多態(tài)性位點(diǎn)與心肌梗死的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、第一部分：心肌梗死(MI)是全球范圍內(nèi)致死和致殘的主要疾病之一。經(jīng)過多年的研究，醫(yī)學(xué)界依然無法真正闡明其病因，也無法準(zhǔn)確識(shí)別高?；颊摺Ｐ募」Ｋ朗且环N復(fù)雜的異質(zhì)性疾病，是基因和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，遺傳度超過50％?；蚝铜h(huán)境因素影響動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，冠狀動(dòng)脈斑塊的形態(tài)、代謝，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定，凝血和纖溶系統(tǒng)的平衡，血栓的形成，乃至各種臨床表現(xiàn)。找出與心肌梗死易感性相關(guān)的基因變異可以增進(jìn)對(duì)心肌梗死病理生理機(jī)制的了解，進(jìn)而促

2、進(jìn)心血管疾病的預(yù)防和藥物治療。目前己知的冠心病(包括心肌梗死)風(fēng)險(xiǎn)因素除了1981年已被描述過的246個(gè)以外，近些年來又發(fā)現(xiàn)了多種風(fēng)險(xiǎn)因素，如:與凝血異常升高和纖溶能力降低有關(guān)的分子;與心血管重塑和(或)炎癥、同型半膚氨酸相關(guān)的分子;細(xì)胞粘附分子(如玻連蛋白):以及感染標(biāo)志物。玻連蛋白廣泛分布在血漿、細(xì)胞外基質(zhì)和血小板a一顆粒中，是一種具有多種功能的蛋白。近來的研究表明，玻連蛋白參與動(dòng)脈粥樣硬化形成和血栓形成，并在其中起重要的調(diào)節(jié)作用，

3、而這二者正是與心肌梗死發(fā)生密切相關(guān)的病理生理過程。因此，我們提出假設(shè)，玻連蛋白基因變異會(huì)增加心梗的風(fēng)險(xiǎn)。
　　 研究目的：本研究擬在中國人群中驗(yàn)證玻連蛋白基因變異性與心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。
　　 對(duì)象和方法：本研究先在一個(gè)含有778個(gè)心肌梗死病例和456個(gè)正常對(duì)照的人群中對(duì)tag-SNP rs2227728(2891'I5C)進(jìn)行了分型，隨后在一個(gè)包含310個(gè)心肌梗死病例和821個(gè)正常對(duì)照以及一個(gè)包含565個(gè)心肌梗死病例和

4、563個(gè)正常對(duì)照的獨(dú)立人群中進(jìn)行了重復(fù)。為了研究其潛在的機(jī)制，本研究進(jìn)一步運(yùn)用熒光素酶分析研究啟動(dòng)子區(qū)的玻連蛋白變異對(duì)基因表達(dá)的影響效應(yīng)，并用凝膠遷移試驗(yàn)確定受其影響的轉(zhuǎn)錄因子。
　　 研究結(jié)果：本研究發(fā)現(xiàn):與攜帶T基因型相比，攜帶C等位基因能夠顯著增加心肌梗死的風(fēng)險(xiǎn)。在未校正傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素前，顯性模式下三個(gè)人群的優(yōu)勢比(OR)分別為1.54(95％可信區(qū)I1[CI]:1.21到1.97, P=0.001),1.56(95％CI:

5、1.19到2.04, P=0.001)和I.49(95％CI:1.17到1.89, P=0.001);加性模式下三個(gè)人群的OR分別為1.42{95％CI:1.16到1.74, P=0.001),1.47(95％CI:1.17到1.84, P=0.001)和1.35(95％CI:1.11到1.64,P=0.003)。在校正了傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素后，顯性模式下三個(gè)人群的OR分別為1.57(95％CI:1.18到2.08, P=0.002)，1.47

6、(95％CI:1.03到2.1, P--0.034)和1.52(95％CI:1.06 to2.18, P=0.022);加性模式下三個(gè)人群的OR分J為1.45(95％CI:1.14到1.83,P=0.002),1.37(95％ CI:1.02到1.83, P=0.036)和1.38195％CI: I.04到1.84, P=0.027)。功能實(shí)驗(yàn)證明在含有rs2227720(-148C) and rs2227721(-78G>T)變異位點(diǎn)

7、的玻連蛋白啟動(dòng)子區(qū)的轉(zhuǎn)錄活性升高了44％，并引起了特定轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合活性的差異。
　　 結(jié)論：本研究表明玻連蛋白基因變異可能是心肌梗死易感性的基因標(biāo)記之一，并為今后在世界上開展玻連蛋白基因變異性與心肌梗死的關(guān)聯(lián)研究提供了基礎(chǔ)。
　　 第二部分：
　　 心肌梗塞是全球范圍內(nèi)致死和致殘的主要疾病之一。經(jīng)過多年的研究，醫(yī)學(xué)界依然無法真正闡明其病因，也無法準(zhǔn)確識(shí)別高危患者。心梗是一種復(fù)雜的異質(zhì)性疾病，是基因和環(huán)境因素共同作

8、用的結(jié)果，遺傳度超過50％?；蚝铜h(huán)境因素影響動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，冠狀動(dòng)脈斑塊的形態(tài)、代謝，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定，凝血和纖溶系統(tǒng)的平衡，血栓的形成，乃至各種臨床表現(xiàn)。找出與心梗易感性相關(guān)的基因變異可以增進(jìn)對(duì)心梗病理生理機(jī)制的了解，進(jìn)而促進(jìn)心血管疾病的預(yù)防和藥物治療。尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)以及尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPAR)己經(jīng)被證明能夠廣泛參與多種病理生理過程，包括:蛋白水解、炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化形成、血管發(fā)生、斑

9、塊不穩(wěn)定以及纖溶;這些過程都與心肌梗死的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)。我們提出以下假設(shè):影響uPA基因(PLAU)和uPAR基因(PLAUR)所分別編碼的蛋白的表達(dá)與功能的變異，會(huì)進(jìn)一步影響心梗的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　 研究目的：本研究擬在中國人群中驗(yàn)證uPA基因(PLAU)和uPAR基因(PLAUR)功能性單核昔酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)與心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。
　　 對(duì)象和方法：
　　 本研究選取PLAU君PLAUR基因功能多態(tài)

10、性位點(diǎn):位于PLAU基因3'非翻譯區(qū)(3'-UTR)的rs4065(*141 C勸和位于PLAU基因exon6的rs2227564(Pro141 Leu),以及位于PLAUR基因啟動(dòng)子區(qū)的rs344781(-516T5C)，在633個(gè)心肌梗死患者和1237個(gè)年齡和性別匹配的對(duì)照中進(jìn)行基因分型;然后在一個(gè)包含545個(gè)心肌梗死患者和597個(gè)正常對(duì)照的人群中進(jìn)行了重復(fù)。
　　 研究結(jié)果：本研究發(fā)現(xiàn):rs4065T基因型顯著增加心肌梗死

11、的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，而rs2227564和rs3344781則與心肌梗死的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)不相關(guān).與攜帶rs4065C等位基因相比，攜帶rs4065T等位基因能夠顯著增加心肌梗死的風(fēng)險(xiǎn)。在未校正傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素前，第一人群在顯性模式、加性模式和隱性模式下的優(yōu)勢比(OR)分別為1.4(95％可信區(qū)間（CIJ:1.12-1.74, P=0.003),1.42(95％CI:1.17-1.72, P.0004)和2.62(95％CI:1.36-5.05, P=0.

12、004):第二人群在顯性模式、加性模式和隱性模式下的OR分別為1.33(95％CI:1.02-1.74, P=0.034),1.32(95％CI:1.03-1.68, P--0.026)和1.74(95％CI:0.67-4.51, P=0.257)。在校正了傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素后，第一人群在顯性模式、加性模式和隱性模式下的OR分別為1.38(95％CI:1.07-1.78, P=0.012)，1.4(95％CI1.12-1.751.03, P-

13、-0.003)和2.5(95％CI:1.15-5.41, P=0.02);第二人群在顯性模式、加性模式和隱性模式下的OR分別為1.4(95％CI:1.05-1.86, P=0.022), I.4(95％ CI:1.08-1.83, P=0.01)和2.5(95％CI:0.93-6.7, P=0.067)。
　　 本研究表明PLAU基因多態(tài)性位點(diǎn)rs4065T可能是心肌梗死易感性的基因標(biāo)記論之一，并為今后在世界上開展PLAU君PL