藏黨參中主要活性成分的測(cè)定及其多糖對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞影響的研究.pdf

1、近年來的研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)境污染的日益嚴(yán)重、生活壓力的逐漸增大等原因?qū)е虏挥Y的發(fā)生率呈上升趨勢(shì)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，我國育齡夫婦患不育癥的比例高達(dá)6％～10％，由于我國人口眾多，患者絕對(duì)數(shù)更顯龐大。生殖健康已成為了科學(xué)研究的熱點(diǎn)，尋求既能調(diào)節(jié)生殖功能又無毒副作用的自然界天然存在的物質(zhì)是人類健康發(fā)展的迫切需要。藏黨參作為藏族地區(qū)一味常用藥，為桔梗科黨參屬植物。據(jù)《藏藥志》和《晶珠本草》記載，具有消炎散腫、滋補(bǔ)壯陽、健脾胃、補(bǔ)氣的功效，在治療不育癥方

2、面發(fā)揮著一定作用。但是，目前對(duì)藏黨參的化學(xué)成分體系和藥理作用的研究均未見報(bào)道。根據(jù)現(xiàn)有對(duì)黨參屬植物的研究可知，黨參屬植物的主要活性成分為多糖和皂苷。本研究以藏黨參的正品--長(zhǎng)花黨參(Codonpsis thalictrifoliaWall.)為研究對(duì)象，測(cè)定了藏黨參多糖和皂苷的含量，優(yōu)化了多糖的提取工藝，并對(duì)藏黨參多糖如何影響睪丸間質(zhì)細(xì)胞功能進(jìn)行了初步研究，為藏黨參的質(zhì)量評(píng)價(jià)和藥理作用研究提供了科學(xué)可靠的數(shù)據(jù)。 本研究通過使用單

3、因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)兩種方法考察了藏黨參多糖的提取條件。單因素實(shí)驗(yàn)中先后考察了提取溫度、時(shí)間、料液比、提取次數(shù)對(duì)藏黨參多糖得率的影響，當(dāng)提取溫度高于70℃、時(shí)間達(dá)到4-6h、料液比大于1:25、提取次數(shù)超過3次時(shí)，藏黨參總多糖得率變化均緩慢。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，影響黨參多糖得率因素的主次順序?yàn)椋禾崛r(shí)間>料液比>提取溫度>提取次數(shù)；多糖最高得率為10.41％；最佳提取條件為提取溫度70℃、提取時(shí)間4h、料液比1:30、提取次數(shù)3次。綜合正交

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果和實(shí)驗(yàn)成本，優(yōu)選方案為提取溫度70℃，料液比1:30，提取4h，共提取2次。 在含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，本研究首次測(cè)定了藏黨參中多糖和皂苷的含量，并將藏黨參的多糖和皂苷含量與中醫(yī)臨床常用黨參--潞黨參進(jìn)行了對(duì)比。結(jié)果顯示，藏黨參和潞黨參中多糖的含量分別為24.32％、18.25％，皂苷的含量分別為3.02％、2.48％，藏黨參中多糖和皂苷的含量都明顯高于潞黨參--多糖含量是潞黨參的1.33倍，皂苷含量是潞黨參的1.22倍。

5、 在藏黨參多糖對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞影響的研究中，本研究通過臺(tái)盼蘭排斥實(shí)驗(yàn)、孵育時(shí)間和睪酮基礎(chǔ)分泌的關(guān)系實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了離體大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞功能。臺(tái)盼蘭排斥實(shí)驗(yàn)結(jié)果：睪丸間質(zhì)細(xì)胞在體外培養(yǎng)32h內(nèi)，活率在78％～98％之間。孵育時(shí)間和睪酮基礎(chǔ)分泌關(guān)系實(shí)驗(yàn)結(jié)果：睪酮基礎(chǔ)分泌量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，二者成線性關(guān)系(R=0.886，P<0.01)，培養(yǎng)至4h后增長(zhǎng)峰趨于平緩。因此，在藏黨參多糖對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞影響的研究中，把細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間定為4h。當(dāng)藏黨參