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文檔簡介
1、1964年鹽酸克倫特羅(CBL)在美國首次合成并獲得專利。在臨床上作為支氣管解痙藥物。20世紀(jì)80年代初,美國脂胺公司研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)CBL的使用劑量達(dá)到治療量的5-10倍時,具有能量重分配作用,可增加動物瘦肉率,降低骨骼肌脂肪。但在隨后的數(shù)年里,國內(nèi)外發(fā)生的多起CBL中毒事件觸目驚心。在我國,CBL殘留監(jiān)測以ELISA作為篩選方法,GC/MS作為確證方法。檢測對象主要為飼料、豬尿、豬肉和豬肝,但都不同程度的存在采集、保存、運(yùn)輸,檢測周期長
2、的缺點(diǎn),為此,我們研究了毛發(fā)中CBL殘留量GC/MS檢測方法以及毛發(fā)與肌肉中CBL殘留量的關(guān)系,為使CBL在動物體內(nèi)殘留的監(jiān)測更科學(xué)、更準(zhǔn)確、更便捷打下基礎(chǔ)。主要工作歸納如下: (1)首先選擇小白鼠作為毛發(fā)中CBL殘留量檢測的實(shí)驗(yàn)動物,以最明顯的心肌損害為指標(biāo)的最大無作用劑量連續(xù)灌胃30天,制作慢性中毒小鼠模型,在不同時間分別采集樣本,用GC/MS檢測。并對拔取和剪取兩種采樣方式進(jìn)行比較。在實(shí)驗(yàn)過程中嘗試了不同的提取溶液和不同的
3、提取時間,最終找到了最佳的提取方式,并對檢測結(jié)果的穩(wěn)定性、重復(fù)性、精密度,線性、回收率等方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)進(jìn)行了評價,結(jié)果另人滿意。 (2)對毛發(fā)和肌肉中CBL殘留量檢測方法從采集樣本—樣本的前處理—GC/MS對衍生液的檢測—檢測結(jié)果的計算的全過程進(jìn)行了方法不確定度影響因素的研究。結(jié)果顯示:衍生液體積、采用擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線和對照液濃度計算樣品溶液濃度及重復(fù)性引入的不確定度較大,建議在實(shí)際檢測中,要注意檢測環(huán)境溫度的控制,還可以選擇與樣品
4、液濃度接近的對照溶液進(jìn)行單點(diǎn)校正計算結(jié)果。 (3)在采集小鼠毛發(fā)樣本的同時,采集了小鼠的肝腎、肌肉與毛發(fā)同時檢測,檢測從灌胃第九天起延續(xù)到停藥后的30天,雌雄分別檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)小鼠毛發(fā)、肝腎和肌肉中CBL殘留量按濃度大小依次為:毛發(fā)>肝腎>肌肉;相同樣本雌鼠高于雄鼠;殘留量達(dá)到峰值的時間,雄鼠早于雌鼠。各樣本CBL的降解速度由快到慢為肌肉>毛發(fā)>肝腎,且雌鼠高于雄鼠。 (4)在以上基礎(chǔ)上,以育肥豬為驗(yàn)證對象,制作慢性中毒
5、模型,分別在不同的時間點(diǎn)采集肝腎、肌肉樣本,驗(yàn)證(3)中的蓄積與降解趨勢。結(jié)果豬體內(nèi)毛發(fā)、肝腎和肌肉中CBL殘留量按濃度大小依次為:毛發(fā)>肝腎>肌肉;相同樣本雌性豬高于雄性豬;到達(dá)峰值的時間,雌雄豬無明顯差異,但不同組織到達(dá)峰值的時間由快到慢為肝腎>肌肉>毛發(fā),降解速度由快到慢為肌肉>肝腎>毛發(fā)。 因此,以毛發(fā)作為檢測對象不僅樣品易采集,易保管,易運(yùn)輸,不需特殊保藏設(shè)施而且能反映所有的CBL暴露史。從毛發(fā)與肌肉中CBL殘留量關(guān)系
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