抑制胞內(nèi)STAT3信號(hào)通路對(duì)肺癌細(xì)胞增殖與侵襲能力的影響.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文抑制胞內(nèi)STAT3信號(hào)通路對(duì)肺癌細(xì)胞增殖與侵襲能力的影響姓名：徐國(guó)泰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：田志剛張建20090316山東大學(xué)碩士畢業(yè)論文STAT313是天然存在的野生型STAT3的異構(gòu)體，它的編碼序列在靠近C末端的50個(gè)堿基對(duì)缺失，編碼一個(gè)分子量為80KDa的蛋白。像野生型STAT3那樣，當(dāng)受到特定細(xì)胞因子刺激時(shí)，STAT3p可以進(jìn)行酪氨酸的磷酸化而活化并且同樣能夠結(jié)合特異的啟動(dòng)子序列。但

2、是，它啟動(dòng)下游基因轉(zhuǎn)錄的能力卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)弱于野生型STAT3。因此，STAT313能夠競(jìng)爭(zhēng)抑制野生型STAT3的活性，我們把STAT313稱為STAT3的顯性負(fù)性異構(gòu)體。實(shí)驗(yàn)方法1蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)STAT313是否成功的轉(zhuǎn)染和表達(dá)到A549和PG細(xì)胞中；2熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)A549和PG細(xì)胞中轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后STAT3的轉(zhuǎn)錄活性；3CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549和PG細(xì)胞轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后細(xì)胞增殖水平；4AnnexinV／P

3、I雙染實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549和PG細(xì)胞轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后細(xì)胞凋亡水平；5蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549和PG細(xì)胞中轉(zhuǎn)染stat3fl質(zhì)粒后檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)基因cyclinDl以及凋亡相關(guān)基因bcl—xl的表達(dá)水平；6Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549和PG細(xì)胞中轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后A549和PG細(xì)胞侵襲能力；7酶譜法檢測(cè)A549和PG細(xì)胞中A549和PG細(xì)胞中與侵襲相關(guān)基因MMP的活性；實(shí)驗(yàn)結(jié)果1DNSTAT3可有效轉(zhuǎn)染并過(guò)表達(dá)到A5

4、49和PG細(xì)胞中；2DNSTAT3可顯著抑制A549和PG細(xì)胞中STAT3的轉(zhuǎn)錄活性；3DNSTAT3可顯著抑制A549和PG細(xì)胞增殖；4DNSTAT3促進(jìn)A549和PG細(xì)胞凋亡；5DNSTAT3下調(diào)A549和PG細(xì)胞中細(xì)胞周期相關(guān)基因cyclinD1以及凋亡相關(guān)基因bclxl的表達(dá)水平；6DNSTAT3可顯著抑制A549和PG細(xì)胞侵襲能力；7DNSTAT3可顯著下調(diào)A549和PG細(xì)胞中侵襲相關(guān)基因MMP2的表達(dá)水平；8JSI124能夠