抑制胞內(nèi)STAT3信號通路對肺癌細胞增殖與侵襲能力的影響.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文抑制胞內(nèi)STAT3信號通路對肺癌細胞增殖與侵襲能力的影響姓名：徐國泰申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：田志剛張建20090316山東大學(xué)碩士畢業(yè)論文STAT313是天然存在的野生型STAT3的異構(gòu)體，它的編碼序列在靠近C末端的50個堿基對缺失，編碼一個分子量為80KDa的蛋白。像野生型STAT3那樣，當(dāng)受到特定細胞因子刺激時，STAT3p可以進行酪氨酸的磷酸化而活化并且同樣能夠結(jié)合特異的啟動子序列。但

2、是，它啟動下游基因轉(zhuǎn)錄的能力卻遠遠弱于野生型STAT3。因此，STAT313能夠競爭抑制野生型STAT3的活性，我們把STAT313稱為STAT3的顯性負性異構(gòu)體。實驗方法1蛋白免疫印跡實驗檢測STAT313是否成功的轉(zhuǎn)染和表達到A549和PG細胞中；2熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測A549和PG細胞中轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后STAT3的轉(zhuǎn)錄活性；3CCK8實驗檢測A549和PG細胞轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后細胞增殖水平；4AnnexinV／P

3、I雙染實驗檢測A549和PG細胞轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后細胞凋亡水平；5蛋白免疫印跡實驗檢測A549和PG細胞中轉(zhuǎn)染stat3fl質(zhì)粒后檢測細胞周期相關(guān)基因cyclinDl以及凋亡相關(guān)基因bcl—xl的表達水平；6Transwell實驗檢測A549和PG細胞中轉(zhuǎn)染stat313質(zhì)粒后A549和PG細胞侵襲能力；7酶譜法檢測A549和PG細胞中A549和PG細胞中與侵襲相關(guān)基因MMP的活性；實驗結(jié)果1DNSTAT3可有效轉(zhuǎn)染并過表達到A5

4、49和PG細胞中；2DNSTAT3可顯著抑制A549和PG細胞中STAT3的轉(zhuǎn)錄活性；3DNSTAT3可顯著抑制A549和PG細胞增殖；4DNSTAT3促進A549和PG細胞凋亡；5DNSTAT3下調(diào)A549和PG細胞中細胞周期相關(guān)基因cyclinD1以及凋亡相關(guān)基因bclxl的表達水平；6DNSTAT3可顯著抑制A549和PG細胞侵襲能力；7DNSTAT3可顯著下調(diào)A549和PG細胞中侵襲相關(guān)基因MMP2的表達水平；8JSI124能夠