IL-17D對(duì)人上皮性卵巢癌細(xì)胞的體外影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開(kāi)和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專(zhuān)利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名：璇盟導(dǎo)師簽章：q了迕二級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)砂Df爭(zhēng)河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論

2、文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě)，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：2K重導(dǎo)師簽章：亍E缸沙f中年≥月萬(wàn)曰中文摘要IL一17D對(duì)人上皮性卵巢癌細(xì)胞的體外影響摘要目的：以基因轉(zhuǎn)染的方法建立能穩(wěn)定表達(dá)和分泌IL17D的人上皮性卵巢癌細(xì)胞株，通過(guò)檢測(cè)基因轉(zhuǎn)染前后卵巢癌細(xì)胞中IL。17D的表達(dá)差異以及外源

3、性IL17D轉(zhuǎn)染對(duì)卵巢癌細(xì)胞表面NKG2D配體ⅫCA的影響，探討IL17D對(duì)人卵巢癌細(xì)胞及固有免疫的體外影響。方法：l體外培養(yǎng)人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細(xì)胞SKOV3、空載體對(duì)照細(xì)胞SKOV3／vector、外源性人IL17D基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞SKOV3／】[L17D及順鉑耐藥細(xì)胞SKoV3／CDDP；以及人卵巢腺癌細(xì)胞0VC—鋤、空載體對(duì)照細(xì)胞0VC燦鵑／Vector、IL17D基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞0VC銣芯／IL17D，連續(xù)傳代培養(yǎng)，于倒置顯

4、微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。2MTT法檢測(cè)不同濃度的順鉑對(duì)SKOV3及SKOV3／CDDP的抑制率，計(jì)算半數(shù)抑制濃度IC50及耐藥細(xì)胞SKOV3／CDDP的耐藥指數(shù)。3MTT法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)(12、24、48、72、96h)7種上皮性卵巢癌細(xì)胞的增殖情況，繪制生長(zhǎng)曲線。4提取7種上皮性卵巢癌細(xì)胞的RNA，利用realtimePCR在RNA水平檢測(cè)7種卵巢癌細(xì)胞IL17D的表達(dá)情況。5應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)M∞2D主要活化性配體MCA在7種

5、上皮性卵巢癌細(xì)胞表面的表達(dá)水平，以熒光指數(shù)(FI)表示ⅫCA蛋白表達(dá)的相對(duì)含量。FI=試驗(yàn)品均道值／對(duì)照品均道值，均道值=lg(xmode值)340。結(jié)果：1人卵巢漿液性乳頭狀腺癌SKOV3／CDDP耐藥指數(shù)=SKOV3／CDDP的IC50值／SKOV3的IC50值，即3609／783=461，可進(jìn)行耐藥試驗(yàn)。2人卵巢漿液性乳頭狀腺癌SKOV3細(xì)胞、人卵巢腺癌0VC銣R3細(xì)胞分別組內(nèi)兩兩比較，轉(zhuǎn)染組生長(zhǎng)速度明顯快于未轉(zhuǎn)染組與空載體組(氏