IL-17D對人上皮性卵巢癌細(xì)胞的體外影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名：璇盟導(dǎo)師簽章：q了迕二級學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)砂Df爭河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論

2、文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：2K重導(dǎo)師簽章：亍E缸沙f中年≥月萬曰中文摘要IL一17D對人上皮性卵巢癌細(xì)胞的體外影響摘要目的：以基因轉(zhuǎn)染的方法建立能穩(wěn)定表達和分泌IL17D的人上皮性卵巢癌細(xì)胞株，通過檢測基因轉(zhuǎn)染前后卵巢癌細(xì)胞中IL。17D的表達差異以及外源

3、性IL17D轉(zhuǎn)染對卵巢癌細(xì)胞表面NKG2D配體ⅫCA的影響，探討IL17D對人卵巢癌細(xì)胞及固有免疫的體外影響。方法：l體外培養(yǎng)人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細(xì)胞SKOV3、空載體對照細(xì)胞SKOV3／vector、外源性人IL17D基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞SKOV3／】[L17D及順鉑耐藥細(xì)胞SKoV3／CDDP；以及人卵巢腺癌細(xì)胞0VC—鋤、空載體對照細(xì)胞0VC燦鵑／Vector、IL17D基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞0VC銣芯／IL17D，連續(xù)傳代培養(yǎng)，于倒置顯

4、微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。2MTT法檢測不同濃度的順鉑對SKOV3及SKOV3／CDDP的抑制率，計算半數(shù)抑制濃度IC50及耐藥細(xì)胞SKOV3／CDDP的耐藥指數(shù)。3MTT法檢測不同時間點(12、24、48、72、96h)7種上皮性卵巢癌細(xì)胞的增殖情況，繪制生長曲線。4提取7種上皮性卵巢癌細(xì)胞的RNA，利用realtimePCR在RNA水平檢測7種卵巢癌細(xì)胞IL17D的表達情況。5應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測M∞2D主要活化性配體MCA在7種

5、上皮性卵巢癌細(xì)胞表面的表達水平，以熒光指數(shù)(FI)表示ⅫCA蛋白表達的相對含量。FI=試驗品均道值／對照品均道值，均道值=lg(xmode值)340。結(jié)果：1人卵巢漿液性乳頭狀腺癌SKOV3／CDDP耐藥指數(shù)=SKOV3／CDDP的IC50值／SKOV3的IC50值，即3609／783=461，可進行耐藥試驗。2人卵巢漿液性乳頭狀腺癌SKOV3細(xì)胞、人卵巢腺癌0VC銣R3細(xì)胞分別組內(nèi)兩兩比較，轉(zhuǎn)染組生長速度明顯快于未轉(zhuǎn)染組與空載體組(氏