復(fù)方制劑消避靈陰道栓的體內(nèi)分析方法及其臨床前藥代動力學(xué)研究.pdf

1、本文采用以液液萃取為前處理的反相高效液相色譜法測定生物樣品中壬苯醇醚的濃度，采用以蛋白沉淀為前處理的反相離子對高效液相色譜法測定生物樣品中以碘離子表征的聚維酮碘的濃度，生物樣品中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品的測定，經(jīng)方法驗證，各自的生物樣品中壬苯醇醚、碘離子的線性、精密度、準(zhǔn)確度均符合生物樣品測定要求。將此方法應(yīng)用于消避靈陰道栓(含壬苯醇醚64mg、聚維酮碘12.8mg)的臨床前藥代動力學(xué)研究中，考察了單方對照藥物和復(fù)方試驗藥物在動物體內(nèi)的藥

2、代動力學(xué)過程，研究了消避靈復(fù)方制劑合并用藥可能存在的藥動學(xué)相互作用，為臨床研究提供依據(jù)。 消避靈陰道栓(每栓含壬苯醇醚64mg、聚維酮碘12.8mg)作為一種外用避孕復(fù)方制劑，藥理研究表明其具有一定的殺精子及抗菌作用，目前正在申報新的復(fù)方制劑。本文的工作旨在對其臨床前藥代動力學(xué)及合并用藥相互作用做一整體評價，以支持人體藥代動力學(xué)研究并為臨床用藥提供參考依據(jù)。 一、生物樣品中壬苯醇醚定量分析方法的建立 本文采用反相

3、高效液相色譜法測定生物樣品中壬苯醇醚的濃度，生物樣品以檸檬酸酸化后用乙醚提取其中的壬苯醇醚，選擇TritonX-100作為內(nèi)標(biāo)化合物。色譜分析采用DiamonsilTM(鉆石)C185μm200x4.6mm ID(迪馬公司)色譜柱，等梯度洗脫方式，流動相組成為甲醇一水(95：5，v/v)，流速為1.0ml/min，熒光檢測：激發(fā)波長226nm，發(fā)射波長300nm，柱溫30℃。生物樣品中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品的測定，經(jīng)方法驗證，在各自的生

4、物樣品濃度范圍內(nèi)，均呈良好線性，r＞0.99；所有測定生物樣品方法的日內(nèi)RSD為2.2～6.6％，日間RSD為3.5～8.1％，方法準(zhǔn)確度在91～108％之間。該方法成功用于壬苯醇醚的Beagle犬、新西蘭兔的藥代動力學(xué)研究。 二、生物樣品中碘離子定量分析方法的建立 本文采用反相離子對高效液相色譜法測定生物樣品中以碘離子表征的聚維酮碘的濃度，生物樣品以硫代硫酸鈉將游離碘還原成碘離子后用乙腈為蛋白沉淀劑沉淀蛋白，選擇阿司匹

5、林作為內(nèi)標(biāo)化合物。色譜分析采用DiamonsilTM(鉆石)C185μm200x4.6mm ID(迪馬公司)色譜柱，等梯度洗脫方式，流動相組成為乙腈-水(內(nèi)含10mmol/L的冠醚，5mmol/L的辛胺，5mmol/L的磷酸二氫鈉，磷酸調(diào)節(jié)pH6.0)=30：70(v/v)，流速為1.0ml/min；紫外檢測波長225nm，柱溫30℃。生物樣品的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品的測定，經(jīng)方法驗證，在各自的生物樣品濃度范圍內(nèi)，均呈良好線性，r＞0.9

6、9；所有測定生物樣品方法的日內(nèi)RSD為3.1～7.8％，日間RSD為4.9～9.8％，方法準(zhǔn)確度在96～104％之間。該方法成功用于聚維酮碘的Beagle犬、新西蘭兔的藥代動力學(xué)研究。 三、Beagle犬單劑量口服給藥單方對照藥物及壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物的臨床前藥代動力學(xué)研究 本文采用自身對照、隨機交叉試驗方法，選擇三制劑三周期的3×3拉丁方設(shè)計給藥方案，Beagle犬單劑量口服給藥壬苯醇醚對照藥物192mg，聚維

7、酮碘對照藥物38.4mg，壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物(含壬苯醇醚192 mg，聚維酮碘38.4 mg)后于不同時間點取血，用上述建立的方法分別測定血漿中壬苯醇醚及以碘離子表征的聚維酮碘的濃度，根據(jù)所得的血漿藥物濃度-時間曲線，采用非房室模型分別估算以壬苯醇醚和碘離子表征的壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物的藥代動力學(xué)參數(shù)，并采用方差分析和雙單側(cè)t檢驗進行統(tǒng)計比較分析，考察壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物中壬苯醇醚和聚維酮碘合并用藥的藥代動力學(xué)相

8、互影響。 單劑量試驗結(jié)果表明：以壬苯醇醚表征的壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物的相對生物利用度為106.8％±13.7％(96.4％～134.3％)，生物利用度符合要求。進一步對lnCmax、lnAUCo0～24進行雙單側(cè)t檢驗，結(jié)果顯示壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物和壬苯醇醚對照藥物雙單側(cè)t檢驗合格，即單用壬苯醇醚及與聚維酮碘合用(壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物)時壬苯醇醚的主要藥代動力學(xué)參數(shù)無明顯改變，表明壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥

9、物合并用藥不存在藥代動力學(xué)相互影響。 以碘離子表征的壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物的相對生物利用度為97.9％±14.0％(82.8％～120.1％)，生物利用度符合要求。進一步對lnCmax、lnAUC0～24進行雙單側(cè)t檢驗，結(jié)果顯示壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物和聚維酮碘對照藥物雙單側(cè)t檢驗合格，即單用聚維酮碘及與壬苯醇醚合用(壬苯醇醚聚維酮碘復(fù)方試驗藥物)時以碘離子表征的聚維酮碘的主要藥代動力學(xué)參數(shù)無明顯改變，表明壬苯醇醚聚

10、維酮碘復(fù)方試驗藥物合并用藥不存在藥代動力學(xué)相互影響。 四、新西蘭兔單劑量陰道給藥單方對照藥物及消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物的臨床前藥代動力學(xué)研究 本文采用自身對照、隨機交叉試驗方法，選擇三制劑三周期的3×3拉丁方設(shè)計給藥方案，新西蘭兔單劑量陰道給藥壬苯醇醚對照藥物64mg，聚維酮碘對照藥物12.8mg，消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物(含壬苯醇醚64mg，聚維酮碘12.8mg)后于不同時間點取血，用上述建立的方法分別測定血漿中壬苯醇

11、醚、以碘離子表征的聚維酮碘的濃度，根據(jù)所得的血漿藥物濃度一時間曲線，采用非房室模型分別估算以壬苯醇醚和碘離子表征的消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物的藥代動力學(xué)參數(shù)，并采用方差分析和雙單側(cè)t檢驗進行統(tǒng)計比較分析，考察消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物中壬苯醇醚和聚維酮碘合并用藥的藥代動力學(xué)相互影響。 單劑量試驗結(jié)果表明：以壬苯醇醚表征的消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物的相對生物利用度為102.9％±7.9％(94.6％～115.6％)，生物利用度符合要求。

12、進一步對lnCmax、lnAUC0～12進行雙單側(cè)t檢驗，結(jié)果顯示消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物和壬苯醇醚對照藥物雙單側(cè)t檢驗合格，即單用壬苯醇醚及與聚維酮碘合用(消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物)時壬苯醇醚的主要藥代動力學(xué)參數(shù)無明顯改變，表明消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物合并用藥不存在藥代動力學(xué)相互影響。 以碘離子表征的消避靈陰道栓復(fù)方試驗藥物的相對生物利用度為96.1％±7.4％(87.7％～108.6％)，生物利用度符合要求。進一步對lnCm