鹽酸頭孢他美的體內(nèi)分析及其臨床前藥代動力學(xué)初步研究.pdf

1、鹽酸頭孢他美注射劑是由合肥醫(yī)工醫(yī)藥有限公司研制開發(fā)，本研究的主要目的是對鹽酸頭孢他美注射劑進(jìn)行臨床前藥代動力學(xué)的整體評價。本文建立了簡單、靈敏、準(zhǔn)確可靠、重現(xiàn)性好的HPLC-UV方法，能夠滿足藥物臨床前藥代動力學(xué)研究中的技術(shù)要求，并使用該方法測定了SD大鼠血漿、SD大鼠各組織以及SD大鼠排泄物等多種生物樣品中頭孢他美的濃度，根據(jù)結(jié)果對頭孢他美的體內(nèi)分布、代謝及排泄進(jìn)行了研究。
　　 研究方法:本文對頭孢他美建立HPLC定量分析方

2、法。檢測不同基質(zhì)中的頭孢他美所使用的色譜條件及樣品前處理方法均有一定的差異。其中:(1)頭孢他美在SD大鼠血漿、SD大鼠各組織以及人血漿中的分析方法為:分析柱Dionex C18;流動相組成:甲醇-10 mmol/L磷酸二氫鉀（含0.05％甲酸）=25∶75(V/V);采用等度洗脫方式，流速1.0 mL/min;柱溫30℃;紫外檢測波長為262 nm。選擇諾氟沙星作為內(nèi)標(biāo)。生物樣品經(jīng)過簡單傳統(tǒng)的蛋白沉淀方法處理。(2)頭孢他美在緩沖液中

3、的分析方法為:分析柱:分析柱Dionex C18;流動相組成:甲醇-10 mmol/L磷酸二氫鉀（含0.05％甲酸）=35∶65(V/V);采用等度洗脫方式，流速1.0 mL/min;柱溫30℃;紫外檢測波長為262 nm。選擇諾氟沙星作為內(nèi)標(biāo)。樣品經(jīng)過高速離心后直接進(jìn)樣分析。(3)頭孢他美在SD大鼠尿液、糞便及膽汁中的分析方法為:分析柱:Ultimate C18;流動相組成為:甲醇-磷酸二氫鉀（0.05％甲酸），尿液和糞便中樣品的檢測

4、采用等度洗脫方式，流速1.0 mL/min，膽汁中樣品的檢測采用梯度洗脫;柱溫30℃。采用外標(biāo)法定量。不同基質(zhì)中分別使用不同的樣品預(yù)處理方法。
　　 按照《化學(xué)藥物非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》的基本要求進(jìn)行完整的方法學(xué)考查，所有生物樣品測定的專屬性、線性、準(zhǔn)確度、精密度、回收率、稀釋效應(yīng)、穩(wěn)定性等均滿足生物樣品的定量分析要求。上述測定方法成功應(yīng)用于SD大鼠的血漿樣品、組織樣品、血漿蛋白結(jié)合樣品以及排泄樣品的研究。研究結(jié)果:(1)本試

5、驗(yàn)設(shè)計SD大鼠單劑量靜脈注射給藥鹽酸頭孢他美注射劑25 mg/Kg，50 mg/Kg，75 mg/Kg進(jìn)行藥代動力學(xué)研究。采用HPLC-UV的方法測定不同時間SD大鼠體內(nèi)的頭孢他美血藥濃度。6只SD大鼠靜脈注射頭孢他美25mg/Kg后，藥時曲線的初始濃度(C0)、末端相消除半衰期(t1/2)、平均駐留時間(MRT)、血漿清除率(Clτ)、表觀分布容積(Vd)、AUC0-∞分別為248.99±54.52μg/mL、0.72±0.09h、0

6、.97±0.11h、0.30±0.03 L/h/kg、0.29±0.02 L/kg、84.54±8.85μg·h/mL。6只SD大鼠靜脈注射頭孢他美50 mg/Kg后，藥時曲線的藥時曲線的初始濃度(C0)、末端相消除半衰期(t1/2)、平均駐留時間(MRT)、血漿清除率(C1τ)、表觀分布容積(Vd)、AUC0-∞分別為587.88±64.54μg/mL、0.81±0.24 h、0.76±0.24 h、0.37±0.06 L/h/kg、

7、0.28±0.06L/kg、137.08±23.74μg·h/mL。6只SD大鼠靜脈注射頭孢他美75 mg/Kg后，藥時曲線的初始濃度(C0)、末端相消除半衰期(t1/2)、平均駐留時間(MRT)、血漿清除率(C1τ)、表觀分布容積(Vd)、AUC0-∞分別為796.54±93.30μg/mL、0.95±0.23 h、0.66±0.08 h、0.36±0.03 L/h/kg、0.24±0.04 L/kg、207.16±18.77μg·h

8、/mL。 C0、AUC0-τ符合線性藥代動力學(xué)特征，隨給藥劑量成線性變化。(2) SD大鼠尾靜脈注射鹽酸頭孢他美注射劑50 mg/Kg后，研究頭孢他美在SD大鼠體內(nèi)的分布情況。結(jié)果表明，從總體上來看，各臟器組織中的藥物含量均低于血漿，其中腎中藥物濃度最高，肝、肺、胃、小腸、脂肪、肌肉、子宮和卵巢次之，心、脾、腦、睪丸組織最少。(3)選擇1μg/mL、5μg/mL和16μg/mL三個濃度值進(jìn)行SD大鼠血漿和人血漿的蛋白結(jié)合率測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

9、表明，4℃冰箱透析72 h達(dá)平衡后頭孢他美人、SD大鼠血漿蛋白結(jié)合率分別約為27％、45％。(4) SD大鼠尾靜脈給藥鹽酸頭孢他美注射劑50 mg/Kg后，研究頭孢他美在SD大鼠體內(nèi)的排泄特征。尿液、糞便中頭孢他美的48 h累積排泄量分別為5403.59±1052.68μg，820.35±296.06μg，排泄率分別為54.04±10.53％，8.20±2.96％;膽汁中頭孢他美的24 h累積排泄量為3344.23±227.82μg，排