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文檔簡介
1、背景:糖尿病增加充血性心力衰竭(congestive heart failure,CHF)的發(fā)病率。CHF是糖尿病患者死亡的主要原因之一,目前認(rèn)為存在一種以心力衰竭為主要表現(xiàn),且與冠心病和瓣膜疾病無關(guān)的特異性糖尿病相關(guān)性心臟疾病,即糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DC)。其發(fā)病機(jī)制尚不清楚,目前認(rèn)為涉及能量代謝紊亂、心肌電生理改變、局部激素作用激活、肌球蛋白同工酶變化等,近年研究發(fā)現(xiàn)粘附分子(adhesi
2、onm olecules,AMs)與糖尿病性心肌病的發(fā)病關(guān)系十分密切。 目的:糖神膠囊在1998年投入臨床時(shí)主要是針對糖尿病周圍神經(jīng)病變的治療,在最近幾年的臨床應(yīng)用中,發(fā)現(xiàn)對糖尿病患者的心臟疾病癥狀也有顯著改善,故設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),系統(tǒng)觀察糖神膠囊在糖尿病大鼠心肌損害中的保護(hù)作用,初步探索黃芪在糖神膠囊中的最佳劑量。并通過實(shí)驗(yàn),對糖神膠囊的心肌保護(hù)作用的機(jī)理做深入探討,為糖神膠囊的臨床推廣提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。以求找到一條防治糖尿病心
3、肌病變的有效途徑。 方法:1.制各糖神膠囊,并根據(jù)其所含黃芪劑量的不同分為:糖神1號(所含黃芪相當(dāng)于成人60公斤體重湯藥用量30克),糖神2號(所含黃芪相當(dāng)于成人60公斤體重湯藥用量60克),糖神3號(所含黃芪相當(dāng)于成人60公斤體重湯藥用量120克)。2.制備動(dòng)物模型:選用健康成年雄性Wistar大鼠50只,體重180-200g。禁食12小時(shí),隨機(jī)選取其中41只造模,用鏈脈佐菌素(Streptozpcin,STZ.美國Sigma
4、公司產(chǎn)品)溶于新配制的0.1mmoI/L枸椽酸鈉緩沖液制成10mg/ml(1%)的STZ溶液,按60mg/Kg體重腹腔注射,72小時(shí)后測尾尖血糖>13.5mmol/L者確認(rèn)為DM大鼠模型。其余9只為正常對照組,腹腔內(nèi)注射與1%STZ等溶積的枸櫞酸鈉緩沖液。3.實(shí)驗(yàn)分組:將成模鼠隨機(jī)分成4組:低劑量黃芪治療組(LDT)、中劑量黃芪治療組(MDT)、高劑量黃芪治療組(HDT);糖尿病對照組(DM),其余9只為正常對照組(NC)。4.灌藥喂養(yǎng)
5、:大鼠每公斤體重用藥劑量按成人6.25倍折算,LDT組:9只,灌喂糖神1號;MDT組:9只,灌喂糖神2號。HDT組:9只,灌喂糖神3號。DM組與NC組:各9只,灌喂等容量的蒸餾水。各組動(dòng)物均用普通飼料喂養(yǎng),自由進(jìn)食飲水,明暗周期1 2h/1 2h,每日灌藥1次,連續(xù)8周。5.檢測指標(biāo)及方法:動(dòng)物灌喂8周后稱體重并檢測如下指標(biāo):(I)心臟取血測空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、血清果糖胺(FIM)、血脂(TG、CHO)。
6、(2)摘取心臟,測其濕重(電子天平稱量),計(jì)算心臟重量指數(shù)(心臟重量mg/體重g)。 (3)所取心臟去掉心包膜,放入10%的甲醛溶液中固定、脫水、石蠟包埋,3um切片,HE及PAS染色,觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。 (4)用鏈酶親和素一生物素一過氧化酶復(fù)合物法(SABC)進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,檢測心肌細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)。(5)取胰腺做常規(guī)病理學(xué)檢查。6所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 ±S表示,組間差異用方差分析,P<0.05
7、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,采用SPSSl3.0軟件分析。 結(jié)果:1.LDT、MDT、HDT三組FBG、HbAlc、FIM的改善均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但與NC組比較亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。2.各組之間TG比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),HDT組CHO與DM組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),與NC組比較亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。3.DM組與NC組比較,體重明顯下降,心臟重量指數(shù)(心臟重量/體重)卻明顯增加(P均<0.01);LDT組、
8、MDT組、HDT組大鼠的心臟重量指數(shù)與DM組相比均下降(P<0.05),但都未達(dá)到正常水平。4.光鏡觀察(HE染色、PAS染色)見除NC組外心肌結(jié)構(gòu)均有破壞,且均有糖原沉積。LDT、MDT、HDT三組較DM組明顯改善,其中HDT組改善最明顯。LDT、MDT、HDT三組的ICAM-1的表達(dá)與DM組相比較均有明顯改善,其中HDT組改善最明顯。5.NC組大鼠胰腺中有較多的胰島,體積大,而DM組胰腺中偶見胰島,體積小,有的甚至沒有胰島;HDT組
9、大鼠胰腺部分修復(fù),但未達(dá)到正常水平。 結(jié)論:1.三組糖神膠囊對糖尿病大鼠心肌損傷均有保護(hù)作用,以高劑量黃芪組效果最佳。2.三組糖神膠囊均能改善糖尿病大鼠的糖代謝,降低其血糖、糖化血紅蛋白、血清果糖胺,但降糖作用不明顯,不能有效控制血糖。3 高劑量黃芪的糖神膠囊能改善糖尿病大鼠的脂代謝,降低膽固醇。4.ICAM-I在糖尿病大鼠心肌的陽性表達(dá)率增加,可能參與了糖尿病大鼠心肌損害的進(jìn)程。5.三組糖神膠囊均能夠降低ICAM-1在糖尿病大
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