miR-32與PTEN在大腸癌組織中表達及其與臨床病理特征的相關性研究.pdf

1、目的：大腸癌(colorectal cancer, CRC)是胃腸道中常見的惡性腫瘤，其發(fā)病機制尚未十分明確。研究發(fā)現(xiàn)多種miRNAs在CRC組織中異常表達，可能參與CRC的發(fā)病過程，而有關miR-32在CRC中的研究報道較少。磷酸酶和張力蛋白同源物基因(phosphatase and tension homologue deleted on chromosome ten，PTEN)是一個抑癌基因，對腫瘤的生長、侵襲和轉移產(chǎn)生負性調節(jié)作

2、用。本研究檢測CRC組織中miR-32的表達，同時檢測PTEN mRNA及其蛋白的表達，分析miR-32的異常表達與PTEN的相關性及與CRC的臨床病理特征之間的關系，初步探討miR-32參與CRC的發(fā)生、發(fā)展過程中的可能機制，為進一步探索CRC的基因治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：選取CRC組織48例，CRC癌旁組織37例，大腸腺瘤組織32例，正常大腸組織15例。采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測上述各組中miR-

3、32及PTEN mRNA在的表達水平;采用蛋白免疫印跡(western blot)法檢測上述各組中PTEN的蛋白質表達水平;采用免疫組織化學法檢測各組中PTEN蛋白的表達及定位;分析CRC組織中miR-32表達量與PTEN mRNA和蛋白表達的相關性，并結合患者的臨床病理資料進行分析。
　　 結果：⑴CRC組miR-32相對表達量顯著升高，是正常對照組的5.76倍，分別與大腸腺瘤組、癌旁組及正常對照組比較，差異均有顯著性(P＜0

4、.05);大腸腺瘤組、癌旁組和正常對照組三組間相互比較，miR-32表達量差異無顯著性(P＞0.05)。⑵CRC組織中PTEN mRNA的表達明顯降低，是正常對照組的0.29倍，分別與癌旁組、大腸腺瘤組及正常對照組相比較，差異均有顯著性(P＜0.05);大腸腺瘤組、癌旁組和正常對照組三組間相互比較，PTEN mRNA的表達量差異均無顯著性(P＞0.05)。⑶CRC組PTEN蛋白表達明顯降低，分別與癌旁組、大腸腺瘤組及正常對照組相比較，差

5、異均有顯著性(P＜0.05)，但癌旁組織、腺瘤組織、正常粘膜組織三組間相互比較，PTEN蛋白的表達量差異均無顯著性(P＞0.05)。⑷miR-32的異常表達與CRC的TNM分期相關，TNM分期越高，miR-32的表達越高(P＜0.05);miR-32也與淋巴結轉移相關，淋巴結轉移患者miR-32表達量增加（P＜0.05）。⑸PTEN的異常表達與腫瘤的TNM分期相關，TNM分期相關越高，PTEN的表達越低(P＜0.05);PTEN也與淋巴

6、結轉移相關，淋巴結轉移的患者PTEN表達下降(P＜0.05)。⑹在CRC組織中，miR-32與PTEN mRNA的表達呈顯著的負相關關系（r=-0.36，P＜0.05）;miR-32與PTEN蛋白的表達呈顯著的負相關關系(r=-0.32，P＜0.05)。⑺PTEN蛋白主要在CRC細胞胞漿中表達;CRC組織中PTEN蛋白表達陽性率為25％(10/30)，低于癌旁組織72.7％(16/22); CRC組的PTEN蛋白含量與其余三組相比明顯下