miR-32與PTEN在大腸癌組織中表達(dá)及其與臨床病理特征的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：大腸癌(colorectal cancer, CRC)是胃腸道中常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病機(jī)制尚未十分明確。研究發(fā)現(xiàn)多種miRNAs在CRC組織中異常表達(dá)，可能參與CRC的發(fā)病過(guò)程，而有關(guān)miR-32在CRC中的研究報(bào)道較少。磷酸酶和張力蛋白同源物基因(phosphatase and tension homologue deleted on chromosome ten，PTEN)是一個(gè)抑癌基因，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移產(chǎn)生負(fù)性調(diào)節(jié)作

2、用。本研究檢測(cè)CRC組織中miR-32的表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)PTEN mRNA及其蛋白的表達(dá)，分析miR-32的異常表達(dá)與PTEN的相關(guān)性及與CRC的臨床病理特征之間的關(guān)系，初步探討miR-32參與CRC的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的可能機(jī)制，為進(jìn)一步探索CRC的基因治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：選取CRC組織48例，CRC癌旁組織37例，大腸腺瘤組織32例，正常大腸組織15例。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測(cè)上述各組中miR-

3、32及PTEN mRNA在的表達(dá)水平;采用蛋白免疫印跡(western blot)法檢測(cè)上述各組中PTEN的蛋白質(zhì)表達(dá)水平;采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組中PTEN蛋白的表達(dá)及定位;分析CRC組織中miR-32表達(dá)量與PTEN mRNA和蛋白表達(dá)的相關(guān)性，并結(jié)合患者的臨床病理資料進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：⑴CRC組miR-32相對(duì)表達(dá)量顯著升高，是正常對(duì)照組的5.76倍，分別與大腸腺瘤組、癌旁組及正常對(duì)照組比較，差異均有顯著性(P＜0

4、.05);大腸腺瘤組、癌旁組和正常對(duì)照組三組間相互比較，miR-32表達(dá)量差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。⑵CRC組織中PTEN mRNA的表達(dá)明顯降低，是正常對(duì)照組的0.29倍，分別與癌旁組、大腸腺瘤組及正常對(duì)照組相比較，差異均有顯著性(P＜0.05);大腸腺瘤組、癌旁組和正常對(duì)照組三組間相互比較，PTEN mRNA的表達(dá)量差異均無(wú)顯著性(P＞0.05)。⑶CRC組PTEN蛋白表達(dá)明顯降低，分別與癌旁組、大腸腺瘤組及正常對(duì)照組相比較，差

5、異均有顯著性(P＜0.05)，但癌旁組織、腺瘤組織、正常粘膜組織三組間相互比較，PTEN蛋白的表達(dá)量差異均無(wú)顯著性(P＞0.05)。⑷miR-32的異常表達(dá)與CRC的TNM分期相關(guān)，TNM分期越高，miR-32的表達(dá)越高(P＜0.05);miR-32也與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者miR-32表達(dá)量增加（P＜0.05）。⑸PTEN的異常表達(dá)與腫瘤的TNM分期相關(guān)，TNM分期相關(guān)越高，PTEN的表達(dá)越低(P＜0.05);PTEN也與淋巴

6、結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者PTEN表達(dá)下降(P＜0.05)。⑹在CRC組織中，miR-32與PTEN mRNA的表達(dá)呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.36，P＜0.05）;miR-32與PTEN蛋白的表達(dá)呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.32，P＜0.05)。⑺PTEN蛋白主要在CRC細(xì)胞胞漿中表達(dá);CRC組織中PTEN蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為25％(10/30)，低于癌旁組織72.7％(16/22); CRC組的PTEN蛋白含量與其余三組相比明顯下