慢性淋巴細(xì)胞白血病間期熒光原位雜交檢測并臨床分析.pdf

1、研究背景：
　　 慢性淋巴細(xì)胞白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)屬于淋巴系統(tǒng)的惡性增殖性疾病，它以小的、外表成熟的淋巴細(xì)胞在外周血、骨髓以及淋巴組織中堆積為特征。在西方國家是成人發(fā)病率最高的白血病，在我國及其它亞洲地區(qū)，CLL發(fā)病率相對較低，約占白血病總數(shù)的5％，但近年來有增高之勢。CLL患者骨髓細(xì)胞分裂相較少，常規(guī)顯帶的細(xì)胞遺傳學(xué)很難對其進(jìn)行診斷，只有40％～50％的患者檢測結(jié)果為陽性，

2、而對療效觀察及微小殘留病的檢測則更為困難。熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)克服了常規(guī)技術(shù)的許多局限，能同時檢測多種基因，分辨復(fù)雜的染色體易位和微小缺失，區(qū)分間期細(xì)胞多倍體和超二倍體等。因此，我們采用間期熒光原位雜交(interphase fluorescence in situ hybridization，I-FISH)技術(shù)，運(yùn)用五種探針探討CLL患者的細(xì)胞遺傳學(xué)異常及其

3、與臨床特征的關(guān)系。
　　 目的：
　　 利用間期熒光原位雜交技術(shù)，有針對性的選擇五種探針，檢測慢性淋巴細(xì)胞白血病患者骨髓細(xì)胞，了解慢性淋巴細(xì)胞白血病常見染色體異常情況及其與臨床各項指標(biāo)的關(guān)系。
　　 對象與方法：
　　 選擇性收集2005年4月～2008年4月染色體核型分析陰性/無分裂相的于山東大學(xué)齊魯醫(yī)院血液科住院的慢性淋巴細(xì)胞白血病患者9例，標(biāo)本為骨髓。診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合張之南主編的《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)

4、》（第三版）；并收集9例患者的相關(guān)臨床特征，包括：性別、年齡、分期（Rai分期及Binet分期）、淋巴結(jié)受累情況、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查淋巴細(xì)胞百分比、外周血白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白含量、血小板計數(shù)、白蛋白含量、乳酸脫氫酶含量以及生存時間。對照組為10例非血液系統(tǒng)惡性疾病患者骨髓。
　　 運(yùn)用四種序列特異性探針P53、D13S25、ATM、RB1，一種著絲粒探針CSP12，利用間期熒光原位雜交技術(shù)，以10例正常對照的骨髓建立各探針的檢測閾值

5、，然后對9例染色體核型分析陰性/無分裂相的CLL患者進(jìn)行檢測。
　　 結(jié)果：
　　 利用10例正常對照的骨髓標(biāo)本建立各探針的檢測閾值。檢測結(jié)果大于閾值為陽性，小于閾值為陰性。p53與D13S25檢測7例患者呈陽性結(jié)果，ATM探針檢測5例患者陽性，RB1與CSP12探針檢測4例患者陽性。9例患者I-FISH檢測結(jié)果均顯示有遺傳學(xué)異常。初步證實ATM缺失與患者血紅蛋白水平有顯著相關(guān)性，ATM缺失陽性的患者更易出現(xiàn)全身廣泛淋巴