慢性淋巴細胞白血病間期熒光原位雜交檢測并臨床分析.pdf

1、研究背景：
　　 慢性淋巴細胞白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)屬于淋巴系統(tǒng)的惡性增殖性疾病，它以小的、外表成熟的淋巴細胞在外周血、骨髓以及淋巴組織中堆積為特征。在西方國家是成人發(fā)病率最高的白血病，在我國及其它亞洲地區(qū)，CLL發(fā)病率相對較低，約占白血病總數(shù)的5％，但近年來有增高之勢。CLL患者骨髓細胞分裂相較少，常規(guī)顯帶的細胞遺傳學很難對其進行診斷，只有40％～50％的患者檢測結果為陽性，

2、而對療效觀察及微小殘留病的檢測則更為困難。熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術克服了常規(guī)技術的許多局限，能同時檢測多種基因，分辨復雜的染色體易位和微小缺失，區(qū)分間期細胞多倍體和超二倍體等。因此，我們采用間期熒光原位雜交(interphase fluorescence in situ hybridization，I-FISH)技術，運用五種探針探討CLL患者的細胞遺傳學異常及其

3、與臨床特征的關系。
　　 目的：
　　 利用間期熒光原位雜交技術，有針對性的選擇五種探針，檢測慢性淋巴細胞白血病患者骨髓細胞，了解慢性淋巴細胞白血病常見染色體異常情況及其與臨床各項指標的關系。
　　 對象與方法：
　　 選擇性收集2005年4月～2008年4月染色體核型分析陰性/無分裂相的于山東大學齊魯醫(yī)院血液科住院的慢性淋巴細胞白血病患者9例，標本為骨髓。診斷標準均符合張之南主編的《血液病診斷及療效標準

4、》（第三版）；并收集9例患者的相關臨床特征，包括：性別、年齡、分期（Rai分期及Binet分期）、淋巴結受累情況、骨髓細胞學檢查淋巴細胞百分比、外周血白細胞計數(shù)、血紅蛋白含量、血小板計數(shù)、白蛋白含量、乳酸脫氫酶含量以及生存時間。對照組為10例非血液系統(tǒng)惡性疾病患者骨髓。
　　 運用四種序列特異性探針P53、D13S25、ATM、RB1，一種著絲粒探針CSP12，利用間期熒光原位雜交技術，以10例正常對照的骨髓建立各探針的檢測閾值

5、，然后對9例染色體核型分析陰性/無分裂相的CLL患者進行檢測。
　　 結果：
　　 利用10例正常對照的骨髓標本建立各探針的檢測閾值。檢測結果大于閾值為陽性，小于閾值為陰性。p53與D13S25檢測7例患者呈陽性結果，ATM探針檢測5例患者陽性，RB1與CSP12探針檢測4例患者陽性。9例患者I-FISH檢測結果均顯示有遺傳學異常。初步證實ATM缺失與患者血紅蛋白水平有顯著相關性，ATM缺失陽性的患者更易出現(xiàn)全身廣泛淋巴