桑葉中東莨菪素提取分離、含量分析及體外抗菌活性研究.pdf

1、中國植桑養(yǎng)蠶歷史悠久。桑樹的各個部分在傳統(tǒng)醫(yī)學上基本都可入藥，歷代中國藥典均收載了桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹的藥用功效。 東莨菪素是一種簡單的香豆素化合物，存在于茄科植物東莨菪，顛茄，傘形科植物白芷等植物，具有抗真菌、抑制樹木腐爛的作用，同時還具有抑制單胺氧化酶、抗炎、祛風、止痛、祛痰解痙、抗腫瘤、抗鼻咽癌9KB細胞等活性。在桑樹中也發(fā)現(xiàn)有東莨菪素的存在，對桑樹中東莨菪素的提取分離、含量篩選及體外抗菌生物活性研究具有重要意義。

2、 1.桑樹中東莨菪素的提取分離。 本研究以西南大學生物技術學院新育成的人工三倍體桑樹品種嘉陵20號的葉片為材料，應用乙醇浸提的方法，采取萃取、結晶、正反向色譜層析、高壓液相(HPLC)等分離手段，以硅膠、聚酰胺、大孔樹脂等為分離材料對東莨菪素進行提取、分離、純化；與標樣對比TLC，根據Rf進行比對鑒定，從8kg嘉陵20號桑葉(干物)中分離得到東莨菪素23mg純品， 2.不同桑樹品種桑葉中東莨菪素含量的測定。

3、應用HPLC對目前生產上廣泛栽植的7個種27個品種桑葉中東莨菪素的含量進行了精確測定：結果發(fā)現(xiàn)：(1)桑樹中東莨菪素的含量差別都比較大的，其中火桑葉東莨菪素的含量最高，為164.2375μg/g，大紅皮的含量最低，為25.1μg/g；(2)不同季節(jié)東莨菪素的含量也有差別，在本次實驗所選材料中，冬季葉片中的含量高于夏季葉片中的含量，夏季火桑葉的含量為164.2375μg/g冬季火桑葉的含量是最高的，高達294.05μg/g，為桑葉的冬季利

4、用提供了參考；(3)桑書不同部位東莨菪素的含量也有差別，對桑樹不同部位東莨菪素的含量進行測定后比較后發(fā)現(xiàn)，火桑和沙二枝條中的東莨菪素含量要低于葉片中的含量，沙二葉片中東莨菪素的含量為219.275μg/g，沙二枝條中東莨菪素的含量為152.15μg/g，說明同一桑樹品種桑樹葉片的東莨菪素的含量要高于桑樹枝條中的含量。 本實驗比較了桑樹和親緣關系較近的構樹葉片中東莨菪素的含量，結果發(fā)現(xiàn)大部分桑樹品種桑葉中，東莨菪素的含量明顯高于構

5、樹，少部分桑樹品種桑葉和構樹中的東莨菪素含量接近，表明東莨菪素的含量在?？浦参镏?，屬間的差異較大，也就是桑屬植物葉片中東莨菪素的含量高于同科的構屬植物，這為桑屬植物開發(fā)提取東莨菪素提供了實驗依據。 3.東莨菪素體外抗菌活性研究。 本研究應用瓊脂擴散法和瓊脂稀釋法，初步對從桑樹中提取分離的東莨菪素，進行了體外抗細菌和抗真菌的活性測定，兩種方法測定結果一致。結果表明，從桑樹中分離提取的東莨菪素對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌沒有明