稀土敏化熒光的機(jī)理研究及在藥物分析中的應(yīng)用.pdf

1、稀土敏化熒光法具有靈敏度高、選擇性好、快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，因此得到研究人員越來(lái)越多的關(guān)注，利用此技術(shù)對(duì)生物樣品及藥物進(jìn)行分析的報(bào)道也越來(lái)越多。本文在該方面進(jìn)行了一些研究，共分以下五部分：
　　 第一章：綜述了稀土敏化熒光技術(shù)的機(jī)理及在生物樣品及藥物分析中的研究進(jìn)展，共引用文獻(xiàn)64篇。
　　 第二章：研究Tb3+與沙拉沙星的結(jié)合反應(yīng)，建立測(cè)定沙拉沙星的熒光分析方法。在pH=5.9醋酸—醋酸鈉緩沖溶液中，Tb3+與沙拉沙星反應(yīng)

2、形成1：2的穩(wěn)定絡(luò)合物，發(fā)出Tb3+特征熒光。通過(guò)測(cè)定Tb3+在激發(fā)波長(zhǎng)335nm，發(fā)射波長(zhǎng)545nm處的特征熒光強(qiáng)度測(cè)定沙拉沙星含量。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，沙拉沙星濃度在0.05～0.65 mg/L范圍內(nèi)符合線(xiàn)性關(guān)系，方法檢出限為0.72μg/L。該方法可直接用于未經(jīng)處理的尿樣中沙拉沙星含量的測(cè)定，六次平行測(cè)定該方法回收率為104.4％～109.0％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.57％～3.07％。本文建立了熒光測(cè)定沙拉沙星的分析方法，該方法利用

3、“稀土敏化熒光”鑭系離子銳線(xiàn)光譜的優(yōu)良特性：譜線(xiàn)窄、熒光壽命長(zhǎng)、穩(wěn)定、背景干擾小，使測(cè)定方法具有更高的穩(wěn)定性、靈敏度和選擇性。
　　 第三章：鋱－環(huán)丙沙星稀土敏化熒光猝滅法測(cè)定痕量葉酸。在pH=5.0的醋酸－醋酸鈉緩沖溶液中，鋱(Ⅲ)與環(huán)丙沙星反應(yīng)形成1：2的穩(wěn)定絡(luò)合物，其最佳激發(fā)、發(fā)射波長(zhǎng)分別為λex=330 nm、λem=545nm。在該反應(yīng)體系中加入適量葉酸溶液，鋱(Ⅲ)與壞丙沙星絡(luò)合物的激發(fā)、發(fā)射波長(zhǎng)位置不變，但熒光強(qiáng)度

4、下降。利用這一現(xiàn)象，建立了簡(jiǎn)單、快速、靈敏的測(cè)定葉酸的熒光分析方法。該方法保持了葉酸結(jié)構(gòu)的完整性，葉酸濃度在22.1～882μg/L范圍內(nèi)符合線(xiàn)性關(guān)系，方法檢出限為7.77μg/L。用于片劑及膠囊中葉酸含量的測(cè)定，結(jié)果滿(mǎn)意。六次平行測(cè)定該方法回收率為93.7％～107.9％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.38％～2.82％。
　　 第四章：銪(Ⅲ)－諾氟沙星－十二烷基硫酸鈉稀土敏化熒光法測(cè)定硫酸新霉素。在pH=7.4的氨－氯化銨緩沖溶液中，

5、銪(Ⅲ)與諾氟沙星反應(yīng)形成穩(wěn)定絡(luò)合物，產(chǎn)生稀土敏化熒光，其最佳激發(fā)、發(fā)射波長(zhǎng)分別為λex=340 nm、．λem=612 nm，表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)的加入使其熒光強(qiáng)度進(jìn)一步增加。在該反應(yīng)體系中加入適量硫酸新霉素溶液，銪(Ⅲ)與諾氟沙星絡(luò)合物的激發(fā)、發(fā)射峰位置不變，但熒光強(qiáng)度降低。利用這一現(xiàn)象，建立了靈敏的測(cè)定硫酸新霉素的熒光分析方法。硫酸新霉素的濃度在0.909～22.72 mg/L范圍內(nèi)符合線(xiàn)性關(guān)系，方法檢出限為0.40

6、 mg/L。該方法用于片劑及滴眼液中硫酸新霉素含量的測(cè)定，快速、簡(jiǎn)便、結(jié)果滿(mǎn)意。六次平行測(cè)定的回收率90.5％～102.3％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.4％～3.5％。
　　 第五章：鋱－環(huán)丙沙星與羅丹明B間稀土敏化熒光能量轉(zhuǎn)移機(jī)理研究。利用熒光光譜法及紫外光譜法研究發(fā)現(xiàn)pH=6.2醋酸－醋酸鈉(HAc—NaAc)水溶液中鋱與環(huán)丙沙星形成絡(luò)合物使鋱?jiān)?90，545，590 nm處出現(xiàn)Tb3+的特征發(fā)射峰。且在545 nm處的熒光強(qiáng)度最大，

7、鋱離子的銳線(xiàn)發(fā)射光譜的特征最強(qiáng)峰545 nm與羅丹明B的最大吸收峰波長(zhǎng)552nm十分接近，能夠發(fā)生能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)表明，隨著堿性染料羅丹明B的加入鋱－環(huán)丙沙星的545 nm特征熒光呈現(xiàn)有規(guī)律降低，表明羅丹明B對(duì)鋱－環(huán)丙沙星熒光有猝滅作用，研究結(jié)果表明其猝滅類(lèi)型主要為靜態(tài)猝滅。又根據(jù)Forster理論，測(cè)得了羅丹明B對(duì)鋱—環(huán)丙沙星的能量轉(zhuǎn)移效率，相互結(jié)合距離等參數(shù)。從而進(jìn)一步證明了該反應(yīng)是單一靜態(tài)猝滅過(guò)程，闡述了其熒光猝滅機(jī)理是通過(guò)能量