CXCR4、SDF-1和VEGF在小兒腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義.pdf_第1頁
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1、授予單位代碼學(xué)號或申請?zhí)柮芗?0459200612046100210004_公開文學(xué)論大位州學(xué)鄭士碩(科學(xué)學(xué)位)CxcR4、SDF1和vEGF在小兒腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義院系名稱:鄭州大學(xué)第三臨床學(xué)院學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:外科學(xué)作者姓名:董正華導(dǎo)師姓名、職稱:張書峰教授二零零九年五月鄭州大學(xué)20()9年碩士畢業(yè)論文CXCR4、SDF1和VEGF在小兒腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義實驗方法1.實驗對象選擇、組織樣本的采集和患者臨床資料的整理

2、選取2007年一2008年間鄭大三附院,鄭大一附院,手術(shù)切除的腎母細(xì)胞瘤30例(其中新鮮標(biāo)本19例蠟塊n例)和瘤旁組織12例(距腫瘤大于SCM)分別為實驗組和對照組,搜集患者的性別,臨床分期,病理類型,有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面的臨床資料,便于統(tǒng)計分析和研究。2.采用Tri201試劑提取腎母細(xì)胞瘤組織RNA。通過1.0%的瓊脂糖凝膠電泳及RNA的OD值評估RNA的含量和純度。3.使用Promega公司的AMV逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行cDNA的逆轉(zhuǎn)錄。

3、RT一PCR擴(kuò)增p一actin的檢測逆轉(zhuǎn)錄效果。4.設(shè)計兩者引物,對CXCR4基因在腎母細(xì)胞瘤及瘤旁正常組織中表達(dá)量進(jìn)行檢測,CXCR4的相對含量=(CXCR4密度p一aetin密度)。5.免疫組化方法檢測CXCR4、SDF一1和VEGF三種蛋白的表達(dá)情況。陽性細(xì)胞胞質(zhì)著色,按染色強(qiáng)度分別進(jìn)行計分。計算機(jī)輔助圖像分析求其光密度(0D)值平均值,代表其蛋白的含量。6.統(tǒng)計學(xué)分析運用SPSS15.0統(tǒng)計軟件,采用x’檢驗,F(xiàn)isher精確檢

4、驗和獨立樣本t檢驗等方法對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。以只0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。實驗結(jié)果1.RT一PCR結(jié)果顯示腫瘤組織中CXCR4mRNA的相對含量高于瘤旁組織(只0.05)。CXCR4mRNA相對含量在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,臨床分期m一W組高于I一11期組,預(yù)后不良組CXCR4mRNA相對含量高于預(yù)后良好組。免疫組化檢測CxCR4蛋白結(jié)果和PCR結(jié)果吻合,呈現(xiàn)一致的變化趨勢。2.腎母細(xì)胞瘤中SDF一1蛋白陽性表達(dá)率是53.

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