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文檔簡介
1、青島大學碩士學位論文miRNA--338調節(jié)人神經(jīng)母細胞瘤細胞中CXCR4表達的研究姓名:蔣志慧申請學位級別:碩士專業(yè):兒科學(小兒外科)指導教師:董蒨20120601青島大學碩士學位論文p r e - m i r - 3 3 8 轉染濃度5 0 n l I /L 為較佳轉染濃度。經(jīng)實驗證實細胞內(nèi)m i R N A 一3 3 8 含量依次遞增的轉染組( I O n M /L 組、3 0 n W L 組、5 0 n M /L 組) C X
2、 C R 4 基因m R N A 相對光密度值分別為0 .7 5 + _ 0 .0 6 、0 .5 8 ±O .0 8 、0 .2 4 ±0 .0 5 ,依次降低,均明顯低于空白對照組1 .1 l±O .0 8 ,空載對照組1 .0 4 ±0 .0 8 ( P < 0 .0 5 ) ,證實m i R N A - 3 3 8 明顯抑制了S H - S Y 5 Y 細胞內(nèi)C X C R 4 基因
3、的轉錄。而通過W e s t e r n - b l o t 蛋白印跡法從蛋白表達水平進一步檢測轉染效率最高的5 0 n M /L 組細胞的C X C R 4 蛋白相對表達量為0 .2 4 _ + 0 .0 6 ,而未轉染的空白對照組為0 .5 6 ±0 .0 8 ,m i R N A - 3 3 8 含量高的轉染組較含量低的未轉染組C X C R 4 蛋白表達明顯下調,組間差異有統(tǒng)計學意義( P < 0 .0 5 )
4、,證明m i R N A 一3 3 8 明顯抑制了S H —S Y 5 Y 細胞內(nèi)C X C R 4 蛋白的表達。結論人工合成的p r e - m i r - 3 3 8 可成功轉染入人神經(jīng)母細胞瘤S H —S Y 5 Y 細胞造成m i R N A - 3 3 8 過表達。m i R N A - 3 3 8 能夠下調神經(jīng)母細胞瘤細胞C X C R 4m R N A 及蛋白的表達參與調節(jié)腫瘤的侵襲與轉移,而利用生物信息數(shù)據(jù)庫尋找m i
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