游離脂肪酸受體1(GPR40)MAPK信號通路與內(nèi)吞機制研究.pdf

1、脂肪酸不僅僅是人體的能量來源，同時也參加一系列的生理活動，比如免疫反應和胰島素分泌。2003年，三個獨立的研究小組發(fā)現(xiàn)一系列的中長鏈脂肪酸能夠激活孤兒G蛋白偶聯(lián)受體GPR40。緊接著GPR40被命名為游離脂肪酸受體1(FFAR1)。GPR40僅在高濃度葡萄糖的存在下能夠促進胰島β細胞葡糖依賴性的胰島素分泌，從而降低了低血糖的風險，因此成為非常重要的治療2型糖尿病的靶標。了解調控GPR40的信號通路為GPR40生理功能的闡述及糖尿病的藥物

2、設計提供理論的基礎。因此我們的研究著力于研究GPR40受體激活后內(nèi)吞的轉運機制。我們構建了融合GFP的表達載體，并篩選得到穩(wěn)定表達GPR40-EGFP受體的單克隆HEK293穩(wěn)定細胞株。熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，GPR40-EGFP主要分布在細胞膜上，也有很大部分位于胞內(nèi)。在配體100μM LA的刺激下，受體分布發(fā)生改變，集中到細胞核周圍，成點狀聚集分布。后期研究發(fā)現(xiàn)GPR40的內(nèi)吞主要通過clathrin依賴型的途徑并受arrestin-

3、3的調控。有趣的是，我們發(fā)現(xiàn)GPR40受體的本底細胞內(nèi)表達水平很高，而clathrin和arrestin-3的knockdown并不影響GPR40受體的本底性內(nèi)吞，暗示GPR40受體配體依賴性和不依賴性的內(nèi)吞機制并不相同。
　　 所有的G蛋白偶聯(lián)受體都能夠促進MAPK的信號級聯(lián)反應，參與調控細胞增殖和凋亡。促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAP激酶，MAPK)鏈是真核生

4、物信號傳遞網(wǎng)絡中的重要途徑之一，其中細胞外信號調節(jié)蛋白激酶(extracellular regulatedprotein，ERK)為MAPK家族重要成員。ERK1/2信號途徑對細胞的分裂、遷移和細胞凋亡等起到調控作用，如GLP-1受體信號轉導能夠通過ERK1/2途徑抑制胰島β細胞的凋亡。糖尿病產(chǎn)生的重要原因之一是胰島素β細胞的損傷，因此，研究GPR40如何調控ERK1/2途徑以及ERK1/2途徑是否參與胰島β細胞的增殖和凋亡過程具有重要