小鼠肌肉衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定.pdf

1、中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院碩士學(xué)位論文小鼠肌肉衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定姓名：汪茜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：蒲傳強(qiáng)20070529軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院碩士學(xué)位論文小鼠肌肉衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定中文摘要目的建立可靠的小鼠肌內(nèi)衛(wèi)星細(xì)胞原代≯善養(yǎng)方法及鑒定技術(shù)。方法取新生小鼠后肢肌獲得細(xì)胞懸液，經(jīng)Percol1分離，結(jié)合差速貼壁法提純肌肉衛(wèi)星細(xì)胞。倒置顯微鏡觀察，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，采用結(jié)蛋白，a一肌動(dòng)蛋白免疫細(xì)胞化

2、學(xué)方法鑒定肌肉衛(wèi)星細(xì)胞。結(jié)果原代骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞在開始分化前呈圓形，通過(guò)細(xì)胞分離、提純后純度為80％以上在F10培養(yǎng)液內(nèi)肌肉衛(wèi)星細(xì)胞生長(zhǎng)良好，1天后細(xì)胞逐漸貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞較小，分布均勻，多呈圓形；3—6天增長(zhǎng)旺盛；到7—10天可生長(zhǎng)至單層成片約50％一70％；1214天后肌肉衛(wèi)星細(xì)胞增殖減緩1015天的衛(wèi)星細(xì)胞結(jié)蛋白，肌動(dòng)蛋白染色清晰結(jié)論使用Percoll分離，差速貼壁法的培養(yǎng)可獲得純度較高的肌肉衛(wèi)星細(xì)胞，而結(jié)蛋白，肌動(dòng)蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染