腦脊液生物標(biāo)志物在病理確診的額顳葉變性和阿爾茨海默病中的研究.pdf

1、目的：額顳葉變性(FTLD)是一種早發(fā)的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)變性疾病，語(yǔ)言功能障礙、社會(huì)行為及執(zhí)行功能障礙以及人格改變是其最常見(jiàn)的臨床特征。FTLD是65歲以下人群中引起癡呆的第二位常見(jiàn)疾病，在這個(gè)年齡段中，其發(fā)病率與阿爾茨海默病(AD)幾乎一致。AD是以進(jìn)行性記憶等認(rèn)知功能障礙為主要表現(xiàn)的神經(jīng)變性病，是目前引起癡呆的最主要疾病。 基于多種原因二者的鑒別至關(guān)重要。病因的不同導(dǎo)致治療的差異，另外二者的生存時(shí)間及病情進(jìn)展亦有差異。雖然二

2、者的病理表現(xiàn)各異，F(xiàn)TLD與多種神經(jīng)病理異常有關(guān)，根據(jù)最近的一個(gè)國(guó)際FTLD工作組的分類標(biāo)準(zhǔn)，F(xiàn)TLD被分為tau-陽(yáng)性和tau-陰性兩種病理類型。FTLD tau-陽(yáng)性和tau-陰性兩種病理類型均與AD不同，AD以tau蛋白的積聚造成神經(jīng)原纖維纏結(jié)以及細(xì)胞外β淀粉樣蛋白的積聚形成的老年斑為病理診斷標(biāo)準(zhǔn)。由于存在一些不典型的臨床表現(xiàn)，例如AD的額葉變異型或者表現(xiàn)明顯記憶障礙的FTLD，有時(shí)做出正確的臨床診斷很困難。目前世界范圍內(nèi)，各國(guó)學(xué)

3、者試圖尋找出理想的生物標(biāo)志物，用于鑒別疾病的診斷和對(duì)疾病治療療效的評(píng)定，但結(jié)果仍存爭(zhēng)議。 本研究通過(guò)分析病理和/或基因突變證實(shí)的FTLD患者中腦脊液標(biāo)志物，探討腦脊液標(biāo)志物在鑒別FTLD和AD中的價(jià)值。本研究的亮點(diǎn)是所有病人均為尸檢病理證實(shí)或者基因突變證實(shí)FTLD診斷及尸檢病理證實(shí)AD診斷，測(cè)定患者生前腦脊液標(biāo)志物水平。認(rèn)知功能標(biāo)志物也是用于鑒別FTLD及AD的手段之一。神經(jīng)心理測(cè)試在尸檢證實(shí)的FTLD及AD中不同，因此本研究也

4、試圖探討神經(jīng)心理測(cè)試結(jié)果是否能有助于提高腦脊液標(biāo)志物的診斷價(jià)值。 方法： 1、研究對(duì)象 在113例患者腦脊液標(biāo)本中，選取36例尸檢病理或基因突變明確診斷的標(biāo)本。其中包括尸檢病理證實(shí)的：FTLD(n=1 5)，基因突變證實(shí)的FTLD(n=2)，尸檢證實(shí)的AD(n=19)，上述標(biāo)本均來(lái)源于美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)神經(jīng)內(nèi)科。另外13例患者腦脊液標(biāo)本由荷蘭Erasmus醫(yī)學(xué)中心神經(jīng)內(nèi)科提供，其中4例為尸檢證實(shí)，9例為基因突變證

5、實(shí)的FTLD。FTLD及AD的臨床診斷先由一位經(jīng)驗(yàn)豐富的神經(jīng)科醫(yī)生作出臨床評(píng)估，然后整個(gè)研究小組討論做出診斷，經(jīng)過(guò)血液學(xué)檢查、頭顱MRI或CT檢查及功能神經(jīng)影像等檢查，排除腦血管病、正常顱壓腦積水、甲狀腺疾病、維生素B12缺乏等其它導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙的疾病。在FTLD中，組織病理診斷為13例tau-陽(yáng)性，17例tau-陰性患者。 13例認(rèn)知功能正常的健康老年人的腦脊液檢查作為正常老年人的腦脊液tau-蛋白和Aβ42的水平范圍。所有

6、病人和其法律授權(quán)的監(jiān)護(hù)者均參加美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)或荷蘭Erasmus醫(yī)學(xué)中心倫理審查委員會(huì)的審查程序并簽署同意書。 2、材料和步驟(1)、腰椎穿刺獲取腦脊液，留取10ml腦脊液用于臨床常規(guī)腦脊液檢查，另留取2ml腦脊液于一紅帽標(biāo)本管中，置于-80℃快速冷凍。 (2)、tau蛋白及Aβ42的測(cè)定應(yīng)用三明治夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)腦脊液中總tau蛋白水平及Aβ42水平。 (3)、神經(jīng)心理測(cè)試①工作記憶(W

7、orking memory，forward and backwards digit span)；②字母分類命名流暢性測(cè)試(Letter category naming fluency)；③波士頓命名測(cè)試 (Confrontation naming， 15-item version of the Boston naming test)；④動(dòng)物分類命名流暢性測(cè)試 (Animal category naming fluency)；⑤模仿幾何圖

8、形(Geometric figure copy)；⑥字串學(xué)習(xí)測(cè)試(Verbal Serial List LearningTest，including 10-word list administered over three trials，delayed free recall，and delayed recognition)。 (4)、神經(jīng)病理診斷兩位資深的病理科醫(yī)生(M.S.F.，J.Q.T.)復(fù)習(xí)所有病例后，根據(jù)最近的額顳葉癡呆和P

9、ick’S病工作組的統(tǒng)一診斷標(biāo)準(zhǔn)做出神經(jīng)病理診斷。 3、統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS 12.0軟件包進(jìn)行所有統(tǒng)計(jì)分析(SPSS，Chicago，IL)。所有計(jì)量數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，t檢驗(yàn)用于兩組年齡及腦脊液tau、Aβ42和tau/Aβ42水平的分析，兩組性別差異及不同腦脊液標(biāo)志物水平組的比例通過(guò)卡方檢驗(yàn)完成，認(rèn)知功能測(cè)試的結(jié)果以z-score表示，設(shè)z-score＜-2.32，相當(dāng)于p＜0.01。Spearm

10、an系數(shù)檢驗(yàn)用于相關(guān)性分析。ROC曲線用于分析不同變量鑒別兩種疾病的性能。 結(jié)果： 1、FTLD組的腦脊液總tau蛋白濃度(p＜0.01)和tau/Aβ42比率(p＜0.00 1)明顯低于AD組。FTLD組腦脊液Aβ42的濃度明顯高于AD組(p＜0.001)。同樣的結(jié)果在也見(jiàn)于尸檢證實(shí)的FTLD病人中，即腦脊液總tau蛋白濃度和tau/Aβ42明顯低于AD組，Aβ42的濃度明顯高于AD組(p＜0.0 1)。 2、

11、tau陰性組病人腦脊液tau蛋白水平及tau/Aβ42比率均低于AD組(p＜0.0 1)。同樣，tau陽(yáng)性病人組腦脊液tau蛋白水平及tau/Aβ42也低于AD組(p＜0.0 1)。tau陰性病人的腦脊液tau、Aβ42和tau/Aβ42比率低于tau陽(yáng)性病人，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3、AD組腦脊液tau蛋白水平及tau/Aβ42比率明顯高于健康對(duì)照組(p＜0.0 1)，Aβ42則低于對(duì)照組(p＜0.01 )，而FTLD組與對(duì)照組相

12、比則無(wú)差異。 4、ROC曲線分析顯示腦脊液tau蛋白的曲線下面積(AUC)為0.79(p=0.001)。tau/Aβ42比率的AUC值為0.93(p＜0.001)。取截?cái)嘀?.06，腦脊液tau/Aβ42比率鑒別FTLD與AD的診斷靈敏性為78.9％，特異性為96.6％。當(dāng)腦脊液tau蛋白的截?cái)嘀禐?03.05pg/ml時(shí)，tau蛋白用于鑒別FTLD與AD的診斷靈敏性為68.4％，特異性為89.7％。 5、z-score分析顯示

13、FTLD組中腦脊液tau水平明顯減低的病人比例(13.3％)高于AD組(0)。AD組病人腦脊液tau蛋白水平增高的(52.6％)明顯多于FTLD組(10％)(p=0.002)。AD組病人的tau/Aβ42比率在增高范圍的(52.6％)明顯多于FTLD組(0)(p＜0.001)。 5、z-score分析顯示FTLD組的波士頓命名測(cè)試明顯受損；AD組的視覺(jué)構(gòu)建測(cè)試明顯受損。動(dòng)物分類命名流暢性測(cè)試和延遲自由回憶記憶測(cè)試在FTLD和AD

14、兩組均明顯受損。 6、FTLD中，tau/Aβ42比率與波士頓命名測(cè)試和延遲自由回憶記憶測(cè)試呈明顯負(fù)相關(guān)(p＜0.05)。AD中，tau及tau/Aβ42比率與動(dòng)物分類命名流暢性測(cè)試呈明顯正相關(guān)(p＜0.0 1)，tau/Aβ42比率與波士頓命名測(cè)試呈正相關(guān)(p＜0.05)。 7、腦脊液tau和tau/Aβ42比率與神經(jīng)心理測(cè)試結(jié)合，顯示僅當(dāng)腦脊液tau蛋白水平結(jié)合波士頓命名測(cè)試時(shí)，與單純腦脊液tau蛋白水平相比，ROC

15、值略有提高(AUC=0.81，p=0.002)。腦脊液tau/Aβ42比率與波士頓命名測(cè)試結(jié)合(AUC=0.81，p=0.002)及動(dòng)物分類命名流暢性測(cè)試結(jié)合(AUC=0.76，p=0.009)顯示AUC有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但當(dāng)與tau/Aβ42比率自身的AUC(0.93)相比時(shí)，tau/Aβ42比率與神經(jīng)心理測(cè)試的結(jié)合并不能提高其診斷的靈敏性和特異性。 結(jié)論： 1、FTLD組中腦脊液tau蛋白及tau/Aβ42比率明顯低于A