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文檔簡介
1、目的:探討納米雄黃對不同宮頸癌細(xì)胞株Hela(HPV18陽性,腺癌),Caski(HPV16陽性,鱗癌),C33A(HPV陰性,腺癌)增殖、凋亡及其對HPV16/18 E6、 E7 mRNA及E6、E7蛋白的影響。
方法:體外培養(yǎng)三種不同宮頸癌細(xì)胞,采用不同質(zhì)量濃度(5,10,20,40ug/ml)納米雄黃作用于不同宮頸癌細(xì)胞不同時(shí)間(24487296h)/(48h),相差顯微鏡下觀察不同質(zhì)量濃度組與對照組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;
2、MTT法測定藥物對細(xì)胞生長的抑制作用;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測HPV16/18 E6/E7 mRNA的表達(dá);免疫組化法檢測HPV16/18 E6/E7蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:不同濃度納米雄黃處理不同細(xì)胞株,均不同程度抑制細(xì)胞生長,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,具有時(shí)間濃度依賴性,其中對Caski細(xì)胞作用最強(qiáng),對C33A細(xì)胞作用最弱;流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果表明,不同質(zhì)量濃度的納米雄黃可促進(jìn)細(xì)胞凋亡,且呈濃度依賴性;
3、細(xì)胞周期結(jié)果顯示高質(zhì)量濃度組(20,40ug/ml)對HPV陽性宮頸癌細(xì)胞有G2/M期阻滯;實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示不同濃度納米雄黃可不同程度抑制E6 E7 mRNA的表達(dá),且隨濃度增大,抑制作用增大,對E6基因的抑制作用強(qiáng)于E7基因,對于HPV16型E6 E7 mRNA的抑制作用強(qiáng)于HPV18型;免疫組化結(jié)果顯示,E6 E7蛋白定位于胞漿內(nèi),隨著藥物質(zhì)量濃度的增加,蛋白表達(dá)量減少。
結(jié)論:納米雄黃混懸液可抑制不同宮頸癌
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