納米雄黃對(duì)人宮頸癌細(xì)胞增殖、凋亡及HPV E6-E7的影響.pdf

1、目的:探討納米雄黃對(duì)不同宮頸癌細(xì)胞株Hela(HPV18陽性，腺癌)，Caski（HPV16陽性，鱗癌），C33A(HPV陰性，腺癌)增殖、凋亡及其對(duì)HPV16/18 E6、 E7 mRNA及E6、E7蛋白的影響。
　　 方法:體外培養(yǎng)三種不同宮頸癌細(xì)胞，采用不同質(zhì)量濃度(5，10，20，40ug/ml)納米雄黃作用于不同宮頸癌細(xì)胞不同時(shí)間(24487296h)/(48h)，相差顯微鏡下觀察不同質(zhì)量濃度組與對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;

2、MTT法測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)HPV16/18 E6/E7 mRNA的表達(dá);免疫組化法檢測(cè)HPV16/18 E6/E7蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:不同濃度納米雄黃處理不同細(xì)胞株，均不同程度抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，具有時(shí)間濃度依賴性，其中對(duì)Caski細(xì)胞作用最強(qiáng)，對(duì)C33A細(xì)胞作用最弱;流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明，不同質(zhì)量濃度的納米雄黃可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且呈濃度依賴性;

3、細(xì)胞周期結(jié)果顯示高質(zhì)量濃度組(20，40ug/ml)對(duì)HPV陽性宮頸癌細(xì)胞有G2/M期阻滯;實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示不同濃度納米雄黃可不同程度抑制E6 E7 mRNA的表達(dá)，且隨濃度增大，抑制作用增大，對(duì)E6基因的抑制作用強(qiáng)于E7基因，對(duì)于HPV16型E6 E7 mRNA的抑制作用強(qiáng)于HPV18型;免疫組化結(jié)果顯示，E6 E7蛋白定位于胞漿內(nèi)，隨著藥物質(zhì)量濃度的增加，蛋白表達(dá)量減少。
　　 結(jié)論:納米雄黃混懸液可抑制不同宮頸癌