靶向抑制EGFR、COX-2治療肝門膽管癌初步研究.pdf

1、目的：上皮來源腫瘤常見表皮生長因子受體和COX-2蛋白的異常表達。嘗試采用EGFR抑制劑和COX-2抑制劑治療這些腫瘤已取得了一定的成功。本研究擬闡明EGFR在肝門膽管癌中的表達和臨床預后意義；評價聯(lián)合靶向抑制COX-2、EGFR在肝門膽管癌治療中的作用。 方法：用免疫組化染色檢測33例肝門膽管癌組織中EGFR及其下游通路蛋白p-MAPK等指標的表達，評價這些指標表達與臨床病理學參數(shù)及患者預后的關系。聯(lián)合EGFR酪氨酸激酶抑制劑

2、(EGFR-selectivetyrosinekinaseinhibitor，EGFRTKI)Erlotinib和COX-2抑制劑(Cox-2inhibitor，Cox-2I)celecoxib作用于肝門膽管癌細胞株，采用MTT、流式細胞學分析，觀測細胞增殖、細胞凋亡、細胞生長周期變化。ELISA方法檢測培養(yǎng)細胞分泌的PGE2含量。Western方法測定藥物作用后細胞內EGFRTKI作用通路的下游蛋白變化以及凋亡、細胞周期相關蛋白的表達

3、。裸鼠荷瘤實驗評價藥物體內作用效果，Erlotinib、celecoxib用藥三周，觀測腫瘤變化。 結果：1.肝門膽管癌中EGFR、p-MAPK、COX-2、VEGF和E-cadherin的陽性表達率分別為36.4，75.8，93.9，57.6和15.2％。臨床病理學上，EGFR陽性表達和腫瘤細胞分級(p=0.028)、淋巴管浸潤(p=0.016)、神經侵犯(p=0.003)相關。生存分析顯示EGFR表達是顯著的負性預后因子(p

4、=0.02)。EGFR陽性患者中位生存期27個月，EGFR陰性患者中位生存期15個月。2.聯(lián)合Erlotinib、celecoxib作用肝門膽管癌細胞株，抑制腫瘤細胞QBC939和FRH細胞增殖，兩者具有協(xié)同作用。Erlotinib阻滯QBC939細胞周期于G0-G1期、誘導細胞凋亡，celecoxib顯著增強Erlotinib作用。EGFR通路下游蛋白p-MAPK、p-Akt受到抑制，NF-κB表達下降。p27和caspase-3裂解

5、片斷表達增加。Erlotinib和celecoxib阻滯PGE2的產生，兩者具有協(xié)同作用。3.體內實驗顯示，Erlotinib、celecoxib聯(lián)合用藥顯著抑制腫瘤生長，與對照組、Erlotinib、celecoxib單藥組相比，均有顯著性差異。抑制腫瘤生長的作用伴隨EGFR下游活性蛋白p-MAPK的下調和VEGF、Ki67表達的降低。 結論：EGFR表達和腫瘤進展病變相關，是不良預后的預測因子。Erlotinib、celec