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文檔簡介
1、目的:本研究通過剪斷舌下神經(jīng)來制作小鼠神經(jīng)損傷動物模型。觀察在小鼠舌下神經(jīng)損傷后不同時間段舌下神經(jīng)核內(nèi)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的數(shù)量及形態(tài)變化,探討神經(jīng)元丟失與神經(jīng)膠質(zhì)細胞變化之間的關(guān)系。 方法:實驗動物為成年昆明小鼠30只,雌雄不限,體重30±5g,將其隨機分為2組,每組15只。腹腔注射4%水合氯醛麻醉下,暴露左側(cè)舌下神經(jīng),剪斷后縫合皮膚。分別于術(shù)后第7天和第35天乙醚深麻醉下開胸,心臟灌流,取腦,于4%甲醛溶液中后固
2、定過夜。20%DEPC蔗糖水內(nèi)置換過夜后,OCT冷凍包埋液包埋,選取延髓舌下神經(jīng)核部位冰凍連續(xù)切片,片厚18μm,用于免疫組織化學染色及硫堇染色。觀察舌下神經(jīng)損傷后在不同時間段損傷側(cè)舌下神經(jīng)核內(nèi)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞數(shù)量及形態(tài)的變化。所有數(shù)據(jù)用SPSS11.5軟件進行分析處理。 結(jié)果:在舌下神經(jīng)損傷第7天,損傷側(cè)舌下神經(jīng)核內(nèi)神經(jīng)元出現(xiàn)胞體腫脹、核偏移、尼氏體邊聚,但其數(shù)量(8.00±1.35個/14400μ㎡)與非損傷
3、側(cè)(8.51±1.30個/14400μ㎡)相比無顯著性變化(P>0.05);在損傷第35天,損傷側(cè)舌下神經(jīng)核內(nèi)神經(jīng)元形態(tài)接近正常,其數(shù)量(6.70±1.22個/14400μ㎡)與非損傷側(cè)相比(8.41±0.61個/14400μ㎡)顯著減少(P<0.05)。損傷側(cè)星形膠質(zhì)細胞染色加深、突起增多、變粗、變長、胞體肥大,損傷第7天損傷側(cè)舌下神經(jīng)核內(nèi)星形膠質(zhì)細胞數(shù)目(6.67±0.73個/14400μ㎡)與非損傷側(cè)(5.33±0.62個/144
4、00μ㎡)比較雖然略有增多,但不具備顯著性差異(P>0.05);而在損傷第35天,損傷側(cè)舌下神經(jīng)核內(nèi)星形膠質(zhì)細胞數(shù)目(7.85±0.42個/14400μ㎡)顯著高于非損傷側(cè)(5.41±0.33個/14400μ㎡,P<0.05)。小膠質(zhì)細胞在舌下神經(jīng)損傷第7天胞核增大、突起變短,緊密地圍繞在神經(jīng)元周圍,數(shù)目(9.59±0.80個/14400μ㎡)比非損傷側(cè)(2.52±1.17個/14400μ㎡)顯著增多(P<0.05);在損傷第35天,損
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