中藥復方干預AML白血病干細胞NF-κB及FLT3蛋白表達的研究.pdf

1、提要目的：目的：本研究旨在通過研究中藥復方干預白血病細胞FLT3和NFκB的蛋白表達情況，以探討中醫(yī)藥治療白血病的作用機制。方法：方法：運用中藥對45例AML患者白血病干細胞進行干預，通過免疫印跡法（WesternBloting，WB）觀察干預前后白血病干細胞內NFκB和FLT3的表達情況；同時觀察患者的性別、年齡、治療前外周血白細胞數(shù)及骨髓原始細胞比例，以探討其相關性。結果：結果：AML患者（M1、M2、M4、M5）FLT3陽性率為6

2、2.2%；FLT3的陽性率與患者的FAB分型、性別、年齡無差異（P＞0.05），與患者的外周血白細胞總數(shù)、骨髓原始細胞比例存在差異（P＜0.01）；中藥可下調白血病干細胞FLT3和NFκB基因的蛋白表達水平（P＜0.01）；其中中藥原方組與其拆方扶正組、祛邪組及生理鹽水組（空白對照組）相比，能夠顯著降低白血病干細胞FLT3和NFκB基因的蛋白表達水平（P＜0.01），而扶正組與祛邪組對白血病干細胞FLT3和NFκB基因表達水平的影響無顯

3、著性差異（P＞0.05）。結論：結論：AML患者中存在FLT3的陽性表達；其陽性表達率與患者的年齡、性別、FAB分型無關，與患者初發(fā)或復發(fā)時外周血白細胞計數(shù)及骨髓原始細胞數(shù)成正相關；中藥復方可以下調FLT3及NFκB在AML患者中的表達，其中原方組較祛邪組、扶正組下調作用明顯；揭示了扶正組與祛邪組之間存在協(xié)同作用。關鍵詞AML；NFκB；FLT3；免疫印跡法；中藥目錄引言.................................

4、..............................................................................................1臨床研究.........................................................................................................................

5、......2一、病例選擇.......................................................................................................................2二、診斷標準.................................................................................

6、......................................2三、臨床調查.......................................................................................................................3（一）一般資料統(tǒng)計..............................................

7、.............................................................3（二）實驗室數(shù)據收集.......................................................................................................3實驗研究........................................

8、.......................................................................................4一、主要試劑及耗材...........................................................................................................4二、主要試劑配制.......

9、........................................................................................................4（一）電泳試劑............................................................................................................

10、.......4（二）轉移緩沖液...............................................................................................................6（三）封閉液......................................................................................

11、.................................6（四）PBST洗膜液.............................................................................................................6三、主要儀器............................................................

12、...........................................................6四、實驗方法.......................................................................................................................7（一）中藥制備...........................

13、........................................................................................7（二）骨髓單個核細胞的提取...........................................................................................7（三）白血病干細胞的分選和純化...........

14、........................................................................7（四）細胞培養(yǎng)...................................................................................................................7（五）WesternBloting法檢測NFκB

15、、FLT3的表達......................................................7五、統(tǒng)計方法.......................................................................................................................9統(tǒng)計結果...........................

16、..................................................................................................10一、FLT3的統(tǒng)計結果.......................................................................................................10（一）F

17、LT3在AML中的表達條帶.................................................................................10（二）FLT3陽性表達患者在AML各亞型中的分布分析.............................................10（三）FLT3陽性患者的年齡分析...................................