羊膜和可吸收縫線在小梁切除術中應用的實驗研究.pdf

1、目的：青光眼是一種常見的致盲眼病，濾過手術是藥物、激光治療無法控制的主要治療手段，目前治療青光眼的新技術、新方法不斷出現(xiàn)，但小梁切除術仍是濾過手術中治療青光眼的主要術式。術后失敗率較高，主要原因是手術區(qū)成纖維細胞(fibroblast,Fb)增殖，瘢痕形成以致影響遠期手術療效。 小梁切除聯(lián)合應用絲裂霉素C(Mitomycin C，MMC)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)等調節(jié)傷口愈合的藥物學調節(jié)技術，對減

2、少瘢痕的形成有很好效果，但同時會產(chǎn)生較多副作用。伴隨近年來材料科學和分子生物學迅速發(fā)展，建立現(xiàn)代改良的標準小梁切除術并結合非藥物調節(jié)技術減少手術失敗率成了青光眼濾過性手術的發(fā)展趨勢。 羊膜(amniotic membrane,AM)具有抗原性低、促進眼表上皮化、抑制纖維組織增生和新生血管形成等作用。Coatedvicryl(polyglactin 910)suture(PGIA)，是由90％的丙交酯(lactide，LA)和10

3、％的L-乙交酯(glycolide，GA)人工合成的多聚合成縫線，通過水解作用降解而吸收，有良好的組織相容性。 本實驗通過小梁切除術聯(lián)合生物羊膜與可吸收縫線，并與單純的小梁切除術進行對照，以觀察兩種植入物在小梁切除術中減少瘢痕形成的作用及手術的安全性與有效性，為提高青光眼手術成功率尋找理想的方法。 方法： 1、實驗動物及分組將30只健康大白兔隨機分三組：對照組、實驗1組、實驗2組；每組10只兔20眼，對照組行單純

4、的小梁切除術操作，實驗1組鞏膜瓣下聯(lián)合羊膜移植術(amniotic membrane transplantation，AMT)，實驗2組鞏膜瓣下聯(lián)合PGLA植入。 2、術后第1W內及術后第2W、3W、6W、10W在裂隙燈下觀察結膜傷口愈合情況，結膜充血程度，濾過泡形態(tài)，濾過道通暢性，角膜透明度，前房反應及晶體透明度。 3、測量眼壓于術前及術后第1W、2W、3W、6W、10W各組均用Shiotz眼壓計測量，比較實驗組和對照

5、組在各時間點的眼壓有無差異。 4、組織病理學于術后第1W、2W、3W、6W、10W各組均隨機取2只兔，摘除眼球，將手術部位固定，制成石蠟切片，做HE染色，光鏡下觀察濾過道開放、炎癥反應和異物反應情況；經(jīng)Masson三色染色，觀察濾過道新生膠原纖維生成情況；做增殖細胞核抗原(proliferative cell nucleus antigen PCNA)染色，運用顯微圖像分析系統(tǒng)對染色結果進行免疫組化評分，做統(tǒng)計學分析。

6、結果： 1、三組術后球結膜愈合好，前房反應3d內均消失，均未出現(xiàn)角膜水腫、淺前房、滲出、視網(wǎng)膜脈絡膜脫離等并發(fā)癥，三組各有2例前房出血，對照組出現(xiàn)1例濾過泡滲漏。 2、兩實驗組較對照組結膜充血時間長，且同時間點比較較重，實驗1組比實驗2組充血重，比較均有顯著性差異(P<0.05)。對照組術后2W充血消失，兩實驗組術后3W消失。 3.濾過泡術后第1W三組除對照組1眼外均為Ⅱ級功能性濾過泡；實驗1組和實驗2組均較對照

7、組功能性濾過泡比率高，實驗1組較實驗2組功能性濾過泡比率高。 4、眼壓變化三組之間術前和術后第1W眼壓值均無顯著性差異(P＞0.05)；2W以后各時間點，對照組眼壓較實驗組眼壓高，各時間點比較均有顯著性差異(P＜0.05)；但在各時間點，兩實驗組之間無顯著性差異(P＞0.05)。 5、濾過道開放比率的比較各組濾過道開放比率和病理組織學HE染色所得結果基本一致。 6、組織學觀察 6.1 HE染色：術后早期三

8、組濾過區(qū)均可見較多的炎性細胞浸潤。對照組淋巴細胞和中性粒細胞較多，實驗1組以淋巴細胞和單核巨噬細胞為多，還有中性粒細胞。實驗2組可見中性粒細胞和巨噬細胞浸潤。術后第1W三組濾過道均開放，術后第2W、3W、6W和10W，實驗組濾過道開放比率較對照組高，實驗1組較2組高。 6.2 Masson三色染色：術后第1W三組均無膠原產(chǎn)生；術后第2W，對照組有粗大致密的膠原產(chǎn)生，實驗2組有松散的膠原產(chǎn)生；實驗1組術后3W僅少量膠原產(chǎn)生。

9、 6.3 免疫組織化學染色：術后觀察各時間點，實驗1組、實驗2組PCNA表達均和對照組比較，前兩者PCNA表達較弱，比較均有顯著性差異(P＜0.05)；同時間點比較，實驗1組與實驗2組比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；術后2W以后，實驗1組、實驗2組PCNA表達無明顯變化，趨于穩(wěn)定，未見Fb明顯增生。 結論： 1、兔眼小梁切除聯(lián)合AMT可以抑制Fb的增殖，減少瘢痕形成，較長時間的維持功能性濾過泡。 2、兔眼小梁