γδT細(xì)胞在橋本氏甲狀腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用及干預(yù)研究.pdf

1、背景:TCRγδT細(xì)胞在不同的炎癥和自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用，全反式維甲酸具有多種免疫調(diào)節(jié)作用。
　　目的:探討橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto's thyroiditis，HT)患者γδT細(xì)胞與自身抗體形成之間的關(guān)系及機(jī)制;以及全反式維甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)對(duì)γδT細(xì)胞輔助B細(xì)胞產(chǎn)生自身抗體的調(diào)控作用，尋找潛在的干預(yù)靶點(diǎn)。
　　方法:本次實(shí)驗(yàn)共收集148例臨床標(biāo)本，

2、其中HT患者99例、健康對(duì)照者44例和5例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)γδT細(xì)胞及其亞型的比例以及HLA-DR、CD69、ICOS和CD40L的表達(dá)水平;免疫熒光染色方法觀察5例HT患者甲狀腺組織中γδ T細(xì)胞的浸潤(rùn)情況;免疫組化觀察5例HT和5例單純性甲狀腺腫患者的甲狀腺組織中抗甲狀腺抗體的表達(dá)情況;ELISA檢測(cè)γδ T細(xì)胞與B細(xì)胞共培養(yǎng)上清以及ATRA處理后共培養(yǎng)上清液中IgG和IgM表達(dá)水平，化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)共培

3、養(yǎng)上清液中Tg-Ab和TPO-Ab表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ATRA處理后γδ T細(xì)胞或B細(xì)胞的凋亡水平。
　　結(jié)果:HT患者甲狀腺組織中γδT細(xì)胞數(shù)明顯高于單純性甲狀腺腫對(duì)照組(n=5，5.33±1.20％ vs.2.07±0.44％;P＜0.05)，其中vδ1亞型細(xì)胞占明顯優(yōu)勢(shì)(89.7±2.6％ vs.10.3±2.6％，P＜0.001)。甲狀腺組織中有大量γδT細(xì)胞浸潤(rùn)以及抗甲狀腺抗體的表達(dá)。HT患者（n=19）γδT細(xì)胞表

4、面CD69(8.42±1.08％ vs.1.60±0.38％，P＜0.001)、HLA-DR(58.12±6.36％ vs.37.82±3.70％,P＜0.05)、CD40L(1.58±0.35％ vs.0.15±0.05％，P＜0.01)和ICOS(2.78±0.66％ vs.0.28±0.13％，P＜0.01)分子的表達(dá)水平顯著高于健康對(duì)照組(n=15);尤為重要的是，HT患者的γδT細(xì)胞能夠促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，在γδT細(xì)胞與B細(xì)胞