γδT細胞在橋本氏甲狀腺炎發(fā)病機制中的作用及干預(yù)研究.pdf

1、背景:TCRγδT細胞在不同的炎癥和自身免疫性疾病發(fā)病機制中起著重要的作用，全反式維甲酸具有多種免疫調(diào)節(jié)作用。
　　目的:探討橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto's thyroiditis，HT)患者γδT細胞與自身抗體形成之間的關(guān)系及機制;以及全反式維甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)對γδT細胞輔助B細胞產(chǎn)生自身抗體的調(diào)控作用，尋找潛在的干預(yù)靶點。
　　方法:本次實驗共收集148例臨床標(biāo)本，

2、其中HT患者99例、健康對照者44例和5例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者。應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測γδT細胞及其亞型的比例以及HLA-DR、CD69、ICOS和CD40L的表達水平;免疫熒光染色方法觀察5例HT患者甲狀腺組織中γδ T細胞的浸潤情況;免疫組化觀察5例HT和5例單純性甲狀腺腫患者的甲狀腺組織中抗甲狀腺抗體的表達情況;ELISA檢測γδ T細胞與B細胞共培養(yǎng)上清以及ATRA處理后共培養(yǎng)上清液中IgG和IgM表達水平，化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測共培

3、養(yǎng)上清液中Tg-Ab和TPO-Ab表達水平;流式細胞術(shù)檢測ATRA處理后γδ T細胞或B細胞的凋亡水平。
　　結(jié)果:HT患者甲狀腺組織中γδT細胞數(shù)明顯高于單純性甲狀腺腫對照組(n=5，5.33±1.20％ vs.2.07±0.44％;P＜0.05)，其中vδ1亞型細胞占明顯優(yōu)勢(89.7±2.6％ vs.10.3±2.6％，P＜0.001)。甲狀腺組織中有大量γδT細胞浸潤以及抗甲狀腺抗體的表達。HT患者（n=19）γδT細胞表

4、面CD69(8.42±1.08％ vs.1.60±0.38％，P＜0.001)、HLA-DR(58.12±6.36％ vs.37.82±3.70％,P＜0.05)、CD40L(1.58±0.35％ vs.0.15±0.05％，P＜0.01)和ICOS(2.78±0.66％ vs.0.28±0.13％，P＜0.01)分子的表達水平顯著高于健康對照組(n=15);尤為重要的是，HT患者的γδT細胞能夠促進B細胞產(chǎn)生抗體，在γδT細胞與B細胞