蝎毒多肽提取物抑制Lewis肺癌血管生成實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 觀察蝎毒多肽提取物(PESV)對(duì)Lewis肺癌荷瘤小鼠腫瘤血管內(nèi)皮因子Ⅷ因子、a-SMA、Dll4、Notch1的表達(dá)及腫瘤新生微血管密度(MVD)與成熟度的影響,抑制腫瘤血管生成并進(jìn)一步抑制腫瘤血管成熟,抑制新生血管功能,并進(jìn)一步揭示PESV抗腫瘤的作用機(jī)理,從而將PESV與傳統(tǒng)化療藥物以及抑制血管生成治療相結(jié)合。
　　 方法：
　　 1.建立Lewis肺癌皮下種植瘤模型,將動(dòng)物隨機(jī)分為荷瘤對(duì)照組

2、、PESV組、陽(yáng)性對(duì)照組、化療組、化療與PESV聯(lián)合組、化療與陽(yáng)性對(duì)照聯(lián)合組。檢測(cè)瘤體積并計(jì)算抑瘤率,觀察PESV對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用。
　　 2.常規(guī)HE染色,光鏡下觀察瘤組織病理改變。
　　 3.免疫組織化學(xué)法檢測(cè)瘤組織中Ⅷ因子、a-SMA、Dll4及Notch1蛋白水平表達(dá)。
　　 4.RT-PCR方法檢測(cè)腫瘤組織中血管生成調(diào)控因子Dll4及Notch1基因水平的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　

3、1.PESV對(duì)Lewis肺癌生長(zhǎng)的影響
　　 與荷瘤對(duì)照組相比,PESV對(duì)腫瘤重量的抑制作用不明顯(P≥10.05),PESV組小鼠腫瘤重與荷瘤對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≥0.05),抑瘤率為14.95％。PESV組腫瘤重與陽(yáng)性對(duì)照組相比,無(wú)顯著性差異(P≥0.05)?；熍cPESV聯(lián)合組與化療組相比,差異顯著(P≤0.05),抑瘤率為42.21％?；熍cPESV聯(lián)合組腫瘤體積與化療與陽(yáng)性對(duì)照聯(lián)合組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

4、P≥0.05)。
　　 2.PESV對(duì)Lewis肺癌腫瘤組織中微血管密度和血管成熟的影響
　　 Ⅷ因子表達(dá)于微血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿,其表達(dá)情況可反映腫瘤組織的微血管密度;a-SMA表達(dá)于有功能的血管的基膜上,可用于標(biāo)記腫瘤組織中有功能的血管,與組織中微血管數(shù)量相對(duì)比可反映腫瘤組織的血管成熟度。經(jīng)半定量圖像分析,PESV組與對(duì)照組、化療與PESV聯(lián)合組與化療組相比較,腫瘤組織中微血管密度與血管成熟度前者均明顯低于后者(P≤0.

5、05)。PESV組與陽(yáng)性對(duì)照組、化療與PESV聯(lián)合組與化療與陽(yáng)性對(duì)照聯(lián)合組比較,腫瘤組織中微血管密度與血管成熟度前者與后者無(wú)顯著差異(P≥0.05)。
　　 3.PESV對(duì)Lewis肺癌腫瘤組織中Dll4與Notch1表達(dá)的影響
　　 免疫組織化學(xué)染色顯示,Dll4與Notch1陽(yáng)性產(chǎn)物主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞漿與胞膜上,經(jīng)半定量圖像分析,PESV組與荷瘤組、化療與PESV聯(lián)合組與化療組相比較,腫瘤組織中Dll4與Notch

6、1表達(dá)水平前者均明顯低于后者(P≤0.05)。PESV組與陽(yáng)性對(duì)照組、化療與PESV聯(lián)合組與化療與陽(yáng)性對(duì)照聯(lián)合組比較,腫瘤組織中Dll4與Notch1表達(dá)水平前者與后者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P≥0.05)。
　　 4.PESV對(duì)Lewis肺癌腫瘤組織中Dll4與Notch1基因水平表達(dá)的影響
　　 RT-PCR法檢測(cè)腫瘤組織中Dll4、Notch1mRNA含量的差異。經(jīng)半定量圖像分析,PESV組與荷瘤對(duì)照組、化療與PESV聯(lián)合組

7、與化療組相比較,腫瘤組織中Dll4與Notch1表達(dá)水平前者均明顯低于后者,差異據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。PESV組與陽(yáng)性對(duì)照組、化療與PESV聯(lián)合組與化療與陽(yáng)性對(duì)照聯(lián)合組比較,腫瘤組織中Dll4與Notch1表達(dá)水平前者與后者無(wú)顯著差異(P≥0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.PESV可抑制Lewis肺癌的生長(zhǎng)。
　　 2.PESV可影響腫瘤血管生成。
　　 3.PESV對(duì)腫瘤的作用機(jī)制可能與影