黑鰻藤C-,21-甾體苷類成分的免疫抑制作用研究.pdf

1、本項目研究了黑鰻藤新苷K對二硝基氟苯(DNFB)誘導的小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH)、大鼠同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)以及小鼠OVA特異性免疫反應(yīng)的體內(nèi)免疫抑制活性。實驗結(jié)果顯示黑鰻藤新苷K可顯著降低耳廓腫脹度，抑制小鼠的遲發(fā)型超敏反應(yīng)，并與CsA作用相當；大鼠同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)顯示，黑鰻藤新苷K能明顯延長移植皮片的存活時間，減少皮膚移植排斥反應(yīng)；黑鰻藤新苷K還能顯著地抑制ConA、LPS誘導的OVA免疫小鼠T、B淋巴細胞增殖和OVA誘

2、導的特異性淋巴細胞增殖，能使OVA免疫小鼠血清中的OVA特異性IgG抗體效價顯著降低。進一步研究發(fā)現(xiàn)，黑鰻藤新苷K可顯著抑制小鼠血清中OVA特異性抗體亞類IgG1和IgG2b的抗體效價水平；抑制OVA誘導的特異性Th1細胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2細胞因子(IL-4)的分泌。由此可以推測，黑鰻藤新苷K可通過抑制Th1、Th2細胞免疫反應(yīng)而抑制機體的抗原特異性細胞免疫和體液免疫應(yīng)答，從而有效緩解同種異體移植排斥反應(yīng)和抑制遲發(fā)型超

3、敏反應(yīng)。 為了進一步探討該類C21甾體苷的作用機制，本項目選取了體外作用最為顯著，化學結(jié)構(gòu)與黑鰻藤新苷K相似的黑鰻藤新苷L，用流式細胞術(shù)測定了其對小鼠脾淋巴細胞T細胞亞群CD4+、CD8+細胞的影響，用ELISA法測定了分泌的Th1/Th2細胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ)含量，并用RT-PCR方法分析了Th1/Th2細胞因子及轉(zhuǎn)錄因子GATA-3、T-bet的基因表達水平。實驗結(jié)果顯示，黑鰻藤新苷L可明顯減

4、少ConA誘導的CD4+T細胞的增殖，降低CD4+/CD8+T細胞的比例至正常水平；能使小鼠脾淋巴細胞的培養(yǎng)上清液中Th1/Th2細胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4的量呈濃度依賴性地降低。黑鰻藤新苷L還能濃度依賴性地顯著抑制ConA誘導的Th1/Th2細胞因子和調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子(T-bet、GATA-3)mRNA的高表達。由此表明，黑鰻藤新苷L能通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA-3的mRNA表達而影響Th1和Th2細胞因