農(nóng)桿菌介導芝麻轉(zhuǎn)雙價抗蟲基因的研究.pdf

1、芝麻（Sesamum indicum L.）隸屬于胡麻科胡麻屬，是一年生草本植物，也是世界上最古老的油料作物之一。芝麻籽、芝麻油是重要的食品工業(yè)原料。芝麻，尤其是黑芝麻在醫(yī)療保健方面也有重要作用。因此選育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有抗蟲性狀的芝麻新品種已經(jīng)成為芝麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展的必然要求。隨著科學技術的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因技術為芝麻新品種的培育提供了新的途徑。本研究以晉芝3號為實驗材料，以質(zhì)粒pBI101-Chi-Bmk為載體，采用土壤農(nóng)桿菌介導法對芝麻進行了外

2、源雙價抗蟲基因的轉(zhuǎn)化，旨在獲得具有抗蟲性狀的芝麻新品種，并為芝麻新品種的培育提供技術支持。本研究的內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1、本研究以芝麻為試驗材料，研究了不同外植體、不同激素濃度、不同濃度配比等對芝麻再生體系的影響。結(jié)果表明:以5-8天無菌苗的下胚軸為外植體，在MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上可誘導分化出較高頻率的不定芽;在1/2MS+NAA0.1 mg/L培養(yǎng)基上誘導生根率可達100％。
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3、本試驗探索了農(nóng)桿菌狀態(tài)、菌液濃度、共培養(yǎng)條件和時間以及轉(zhuǎn)化受體對遺傳轉(zhuǎn)化的影響。結(jié)果表明:處于對數(shù)生長期的農(nóng)桿菌，當菌液濃度OD600達到0.4～0.6時，對5-8天無菌苗的下胚軸莖段的外植體進行侵染，并在黑暗條件下共培養(yǎng)2天，其轉(zhuǎn)化效率較高，可達30.52％。
　　3、本試驗對轉(zhuǎn)化芝麻植株進行PCR檢測，檢測出了含有目的基因的特異擴增條帶，證明外源基因已經(jīng)導入芝麻受體細胞中。對田間自然蟲害發(fā)生情況進行了觀察，轉(zhuǎn)基因植株與未轉(zhuǎn)基因