大鼠p-MCAO后延遲給予長時(shí)間亞低溫對NFkB和中性粒細(xì)胞的抑制.pdf

1、低溫在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已被證明具有強(qiáng)大的缺血后神經(jīng)保護(hù)作用。常用的大腦局部缺血的動(dòng)物模型有兩種：一過性大腦中動(dòng)脈阻塞(t-MCAO)和持續(xù)性大腦中動(dòng)脈阻塞(p-MCAO)。根據(jù)對已報(bào)道實(shí)驗(yàn)的分析，低溫在p-MCAO中的治療時(shí)間窗只有1小時(shí)。這限制了低溫治療的臨床可行性。有一項(xiàng)報(bào)道在大鼠全腦一過性缺血模型中，缺血后6小時(shí)給予48小時(shí)的低溫可以減少CA1區(qū)神經(jīng)元的喪失。因此，本實(shí)驗(yàn)在大鼠p-MCAO模型中延遲2小時(shí)和6小時(shí)給予長時(shí)間的低溫。已知大

2、鼠大腦中動(dòng)脈阻塞后數(shù)小時(shí)開始有中性粒細(xì)胞在腦組織的浸潤，24小時(shí)達(dá)高峰；大鼠大腦中動(dòng)脈持續(xù)阻塞后7小時(shí)時(shí)有缺血周圍區(qū)NFkB的活化和向核內(nèi)的轉(zhuǎn)移，且大部分的報(bào)道支持中性粒細(xì)胞浸潤和NFkB活化加重缺血后損傷。 本實(shí)驗(yàn)通過腦組織切片中性粒細(xì)胞和NFkB的免疫組化染色，探索p-MCAO模型延遲給予長時(shí)間輕度低溫的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。 方法：線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈，SD大鼠分為3組，每組10只，分別為A組——延遲2小時(shí)給予22小時(shí)33

3、℃低溫，B組——延遲6小時(shí)給予18小時(shí)33℃低溫，C組——缺血組(對照組)。三組均在缺血后24小時(shí)取腦切片，用MPO抗體進(jìn)行免疫組化染色，計(jì)數(shù)缺血周圍區(qū)浸潤的中性粒細(xì)胞數(shù)，用NFkB p65抗體進(jìn)行免疫組化染色，分別計(jì)數(shù)NFkB p65免疫陽性的細(xì)胞和細(xì)胞核中NFkB p65陽性的細(xì)胞。 結(jié)果：缺血后24小時(shí)梗塞周圍區(qū)有中性粒細(xì)胞的浸潤，NFkB的活化和向核內(nèi)轉(zhuǎn)移。兩組低溫組的中性粒細(xì)胞數(shù)小于對照組(p<0.05)，兩組低溫組N