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文檔簡(jiǎn)介
1、目的與意義:
觀察喹啉衍生物對(duì)前列腺癌PC3細(xì)胞的細(xì)胞間縫隙連接的作用,從細(xì)胞通訊水平探討細(xì)胞間縫隙連接對(duì)順鉑藥物作用的影響,研究該聯(lián)合治療方法對(duì)前列腺癌細(xì)胞的作用及可能機(jī)制,為臨床治療晚期前列腺癌提供新的方法和理論依據(jù)。
方法與材料:
取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的前列腺癌PC3細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),傳代后分別給予不同濃度水平的喹啉衍生物,聯(lián)合順鉑處理24h和48h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),CCK8法檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞的活力,實(shí)時(shí)熒光
2、定量 PCR法檢測(cè)細(xì)胞縫隙連接相關(guān)蛋白Cx43mRNA的表達(dá)及Western Blot檢測(cè)Cx43蛋白的表達(dá)。激光共聚焦檢測(cè)細(xì)胞間GJIC功能的變化。
結(jié)果:
CCK8法檢測(cè)結(jié)果顯示:在不同喹啉濃度組聯(lián)合順鉑處理PC3細(xì)胞24、48h后,前列腺癌PC3細(xì)胞的活力較單純順鉑處理組有明顯的不同。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示:喹啉不同濃度組聯(lián)合順鉑處理PC3細(xì)胞24h后,Cx43mRNA和蛋白都
3、有不同程度的升高。比較單獨(dú)使用順鉑時(shí)Cx43mRNA和蛋白表達(dá)水平差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。激光共聚焦實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:前列腺癌PC3細(xì)胞GJIC功能有不同程度的增強(qiáng),隨著藥物濃度增高,熒光染料在細(xì)胞縫隙連接的表達(dá)數(shù)量逐漸增多,熒光強(qiáng)度也隨之增大,并呈劑量效應(yīng)依賴關(guān)系和時(shí)間依賴效應(yīng)依賴關(guān)系。
結(jié)論:
喹啉衍生物可上調(diào)前列腺癌PC3細(xì)胞的細(xì)胞間縫隙連接 Cx43基因的mRNA及蛋白的表達(dá)水平并促進(jìn)前列腺癌P
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