BPD-MA對人膀胱癌細胞株BIU-87光動力抑制作用及其機制研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學博士學位論文BPD-MA對人膀胱癌細胞株BIU-87光動力抑制作用及其機制研究姓名：許川山申請學位級別：博士專業(yè)：物理醫(yī)學與康復指導教師：吳仕明2002.5.1R P M l l 6 4 0 細胞培養(yǎng)液。提示波長為6 3 2 ．8 r i m 的光不僅能激活新型光敏劑B P D ．M A ，而且易透過實驗用培養(yǎng)板蓋和含1 0 ％小牛血清的R P M l l 6 4 0 細胞培養(yǎng)液。選擇波長為6 3 2 ．8 n m 的光作為

2、本實驗研究中的光源，并檢測實驗用培養(yǎng)板蓋和含1 0 ％小牛血清的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液對該波長光的透射率。結果顯示，實驗用培養(yǎng)板蓋和含l O ％小牛血清的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液對波長為6 3 2 ．8 n m 光的透射率分別為8 9 ．9 8 ±0 ．0 2 ％、8 9 ．1 2 - 4 - 0 ．0 3 ％，根據(jù)公式：細胞實際接受到的光劑量等于實驗用光源光劑量×培養(yǎng)板蓋透射率

3、5;培養(yǎng)液的透射率得出：到達培養(yǎng)細胞的光劑量等于實驗用光源光劑量的8 0 ．1 8 ％，2 ) 將體外培養(yǎng)的人膀胱癌細胞株B I U ．8 7 接種于2 4 孔板，分組，暗室中加入B P D 。M A ，濃度分別為1 2 5 0 、6 2 5 、3 1 2 ．5 n g ／m l ，分別在孵育即刻、1 5 、3 0 、6 0 、9 0 、1 2 0 、1 8 0 分鐘，用熒光分光度計測定B 町- 8 7 胞內光敏劑B P D ．M A

4、的熒光強度值，分析孵育濃度和時間對其吸收的影響。結果顯示，人膀胱癌細胞株B I U ．8 7 對B P D ．M A 的吸收，在孵育9 0 m i n 時達最高峰，隨后進入平臺期。3 ) 體外培養(yǎng)人膀胱癌細胞株B I U ·8 7 經1 2 5 0 n g ／m l的B P D ．M A 孵育9 0 m i n 后，更換為不含B P D - M A 的R P M l l 6 4 0 細胞培養(yǎng)液，分別在即刻、1 0 、1 5 、

5、2 0 、3 0 、6 0 、9 0 、1 2 0 m i n ，利用熒光光度計檢測B [ U ．8 7 胞內B P D ．M A 的熒光強度值。結果顯示：B P D ·M A 孵育9 0 r a i n后更換為不含B P D - M A 的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液1 5 m i n 內人膀胱癌株B I U - 8 7 胞內B P D - M A 熒光強度值變化不明顯( P > 0 ．0 5 ) ，隨后下降

6、迅速。提示體外光動力實驗時應選擇在B P D —M A 與B I U 一8 7 孵育9 0 m i n 后、換液1 5 m i n 內進行激光照射。2 ．B P D ．M A 對人膀胱癌細胞株B I U ．8 7 的光動力抑制作用研究：體外培養(yǎng)的人膀胱癌細胞株B I U ．8 7 接種于9 6 孔板，隨機分組，每組設3 復孔。在暗室中分別加入濃度為O 、3 1 2 ．5 、6 2 5 、1 2 5 0 n g ／m l 的B P D -