BPD-MA對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株BIU-87光動(dòng)力抑制作用及其機(jī)制研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文BPD-MA對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株BIU-87光動(dòng)力抑制作用及其機(jī)制研究姓名：許川山申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)指導(dǎo)教師：吳仕明2002.5.1R P M l l 6 4 0 細(xì)胞培養(yǎng)液。提示波長(zhǎng)為6 3 2 ．8 r i m 的光不僅能激活新型光敏劑B P D ．M A ，而且易透過(guò)實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)板蓋和含1 0 ％小牛血清的R P M l l 6 4 0 細(xì)胞培養(yǎng)液。選擇波長(zhǎng)為6 3 2 ．8 n m 的光作為

2、本實(shí)驗(yàn)研究中的光源，并檢測(cè)實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)板蓋和含1 0 ％小牛血清的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液對(duì)該波長(zhǎng)光的透射率。結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)板蓋和含l O ％小牛血清的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液對(duì)波長(zhǎng)為6 3 2 ．8 n m 光的透射率分別為8 9 ．9 8 ±0 ．0 2 ％、8 9 ．1 2 - 4 - 0 ．0 3 ％，根據(jù)公式：細(xì)胞實(shí)際接受到的光劑量等于實(shí)驗(yàn)用光源光劑量×培養(yǎng)板蓋透射率

3、5;培養(yǎng)液的透射率得出：到達(dá)培養(yǎng)細(xì)胞的光劑量等于實(shí)驗(yàn)用光源光劑量的8 0 ．1 8 ％，2 ) 將體外培養(yǎng)的人膀胱癌細(xì)胞株B I U ．8 7 接種于2 4 孔板，分組，暗室中加入B P D 。M A ，濃度分別為1 2 5 0 、6 2 5 、3 1 2 ．5 n g ／m l ，分別在孵育即刻、1 5 、3 0 、6 0 、9 0 、1 2 0 、1 8 0 分鐘，用熒光分光度計(jì)測(cè)定B 町- 8 7 胞內(nèi)光敏劑B P D ．M A

4、的熒光強(qiáng)度值，分析孵育濃度和時(shí)間對(duì)其吸收的影響。結(jié)果顯示，人膀胱癌細(xì)胞株B I U ．8 7 對(duì)B P D ．M A 的吸收，在孵育9 0 m i n 時(shí)達(dá)最高峰，隨后進(jìn)入平臺(tái)期。3 ) 體外培養(yǎng)人膀胱癌細(xì)胞株B I U ·8 7 經(jīng)1 2 5 0 n g ／m l的B P D ．M A 孵育9 0 m i n 后，更換為不含B P D - M A 的R P M l l 6 4 0 細(xì)胞培養(yǎng)液，分別在即刻、1 0 、1 5 、

5、2 0 、3 0 、6 0 、9 0 、1 2 0 m i n ，利用熒光光度計(jì)檢測(cè)B [ U ．8 7 胞內(nèi)B P D ．M A 的熒光強(qiáng)度值。結(jié)果顯示：B P D ·M A 孵育9 0 r a i n后更換為不含B P D - M A 的R P M l l 6 4 0 培養(yǎng)液1 5 m i n 內(nèi)人膀胱癌株B I U - 8 7 胞內(nèi)B P D - M A 熒光強(qiáng)度值變化不明顯( P > 0 ．0 5 ) ，隨后下降

6、迅速。提示體外光動(dòng)力實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)選擇在B P D —M A 與B I U 一8 7 孵育9 0 m i n 后、換液1 5 m i n 內(nèi)進(jìn)行激光照射。2 ．B P D ．M A 對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株B I U ．8 7 的光動(dòng)力抑制作用研究：體外培養(yǎng)的人膀胱癌細(xì)胞株B I U ．8 7 接種于9 6 孔板，隨機(jī)分組，每組設(shè)3 復(fù)孔。在暗室中分別加入濃度為O 、3 1 2 ．5 、6 2 5 、1 2 5 0 n g ／m l 的B P D -