芹菜素誘導膀胱癌細胞株BIU-87凋亡及機制的研究.pdf

1、膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，術后高復發(fā)率為其顯著特點。芹菜素（apigenin）具有多種藥理活性，如降血壓、鎮(zhèn)靜、抗菌以及雌激素樣作用等，近年來由于發(fā)現(xiàn)其對多種腫瘤具有抑制作用，從而引起腫瘤學者的關注。本研究通過對膀胱癌細胞株BIU-87的體外實驗，探討芹菜素對膀胱癌細胞的作用效果及其機制，為保留膀胱患者術后預防復發(fā)及晚期膀胱癌病人的治療探尋一種新的方法。
　　 第一部分芹菜素對膀胱癌BIU-87細胞體外增殖的影響

2、　　 目的：探討芹菜素在體外對膀胱癌細胞株BIU-87增殖的影響。
　　 方法：MTT法測定不同時間不同濃度芹菜素作用后BIU-87細胞的生長抑制情況。
　　 結果：MTT法檢測發(fā)現(xiàn)：藥物的抑制作用隨其濃度和時間的增加而增大，同一時間不同藥物濃度各組之間以及同一藥物濃度不同時間之間細胞抑制率均有顯著差異（P<0.05）。
　　 結論：芹菜素在體外可明顯抑制膀胱癌BIU-87細胞增殖，呈明顯的劑量-效應、時間--

3、效應關系。
　　 第二部分芹菜素誘導膀胱細胞株BIU-87凋亡及機制
　　 目的：探討芹菜素對膀胱癌細胞株BIU-87體外誘導凋亡情況及其可能機制。
　　 方法：①流式細胞術檢測細胞周期變化情況；②Annexin V-FITC/PI雙染法流式細胞術觀察芹菜素作用后細胞的凋亡情況；③RT-PCR檢測Survivin mRNA表達的變化；④免疫細胞化學SP法檢測Survivin和Caspase-3蛋白表達的變化。

4、r>　　 結果：①2.03μmol/L芹菜素作用72h后，流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)芹菜素可使BIU-87細胞阻滯在G2/M期，并出現(xiàn)明顯的凋亡峰。②流式細胞術雙染法檢測細胞凋亡顯示細胞凋亡率顯著增加（P<0.05）。③RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)芹菜素可使BIU-87細胞Survivin mRNA表達顯著減少（P<0.05），④免疫細胞化學SP法檢測顯示Survivin蛋白表達亦顯著減少（P<0.05），Caspase-3蛋白表達則明顯增加（P<0