MIF抗體對肝癌細(xì)胞株HepG-2的抑制作用及其機(jī)理.pdf

1、目的：近年來有研究表明巨噬細(xì)胞移動抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）在許多腫瘤中都有較高的表達(dá)，并有可能參與腫瘤的血管生成、增殖和遷移。但其具體機(jī)制目前還未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察MIF抗體（MIF antibody）對肝癌細(xì)胞株HepG-2增殖的影響，并探討其可能作用機(jī)制。 方法：四甲基偶氮唑鹽法檢測MIF抗體（50、100、200、400ug/L）對HepG-2細(xì)

2、胞增殖的抑制作用；流式細(xì)胞儀檢測MIF抗體作用HepG-2細(xì)胞48h后細(xì)胞周期的變化；免疫組織化學(xué)方法檢測MIF抗體對CyclinD1蛋白表達(dá)的影響；蛋白印跡（western-blot）法檢測MIF抗體對血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白表達(dá)的影響；ELISA法檢測MIF抗體對HepG-2細(xì)胞分泌釋放白介素-6（interleukin-6，IL-6）濃度的影響。

3、 結(jié)果：MIF抗體可以抑制肝癌細(xì)胞HepG2生長并具有劑量和時間依賴性。MIF抗體可使細(xì)胞周期停滯于G0/G1期，不同濃度（50、100、200、400μg/L）MIF抗體作用48h后，G0/G1期細(xì)胞比例分別為61.34％±1.08％、65.08％±2.71％、71.19％±1.19％、78.39％±1.00％、83.92％±0.51％。不同濃度MIF抗體作用后CyclinD1蛋白表達(dá)率分別為26.06％±0.47％、22.34％±0

4、.75％、18.06％±1.16％、14.03％±0.59％，明顯低于對照組（29.51％±1.28％）。不同濃度MIF抗體作用后VEGF蛋白表達(dá)分別為21.22％±0.68％、19.64％±0.54％、18.04％±0.42％、16.59％±0.66％，明顯低于對照組（23.23％±0.51％）。MIF抗體對HepG-2細(xì)胞分泌IL-6有抑制作用，隨著MIF抗體濃度的增加，其IL-6分泌量也相應(yīng)降低，分別為（210.67±9.31）p