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1、目的:通過(guò)觀察丙泊酚復(fù)合電休克(electroconvulsive therapy,ECT)對(duì)抑郁大鼠行為和學(xué)習(xí)記憶的影響,以及丙泊酚復(fù)合電休克處理后抑郁大鼠海馬組織Fos蛋白、神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitricoxide synthase,nNOS)mRNA和蛋白的表達(dá),一氧化氮合酶(nitric oxidesynthase,NOS)活性和NO含量的變化,探討丙泊酚復(fù)合ECT對(duì)抑郁大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響機(jī)制。 方
2、法 將60,只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分成5組(n=12):對(duì)照組(C組),抑郁模型組(D組),傳統(tǒng)ECT組(E組),丙泊酚復(fù)合ECT組(M組)和丙泊酚組(P組)。C組正常喂養(yǎng),其余組建立慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress,CLJMS)抑郁模型。建模成功后,D組不予治療, E組和M組分別給予單純ECT和丙泊酚復(fù)合ECT各6次治療,P組則于ECT相應(yīng)時(shí)點(diǎn)腹腔注射丙泊酚100mg/
3、kg。各組分別于造模前、造模后、干預(yù)后用曠場(chǎng)法(open-field test)進(jìn)行行為評(píng)分:水平計(jì)分和垂直計(jì)分。干預(yù)后測(cè)評(píng)學(xué)習(xí)記憶功能:Morris水迷宮法測(cè)試逃避潛伏期和平臺(tái)象限距離百分比。所有測(cè)試結(jié)束后,采全部大鼠腦海馬組織,免疫組化法檢測(cè):Fos和nNOS蛋白表達(dá),圖像分析系統(tǒng)分析其免疫反應(yīng)陽(yáng)性表達(dá)產(chǎn)物,檢測(cè)陽(yáng)性產(chǎn)物相對(duì)切面面積比(陽(yáng)性細(xì)胞面積和視場(chǎng)面積的百分比)和平均目標(biāo)灰度值(所測(cè)陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度);RT-PCR法檢測(cè)nNO
4、S-mRNA表達(dá);用分光光度計(jì)檢測(cè)NOS活性和NO含量。全部數(shù)據(jù)采用非參數(shù)檢驗(yàn)和方差分析(ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。 結(jié)果行為評(píng)分:水平計(jì)分和垂直計(jì)分,C組各時(shí)點(diǎn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D組、P組造模后和干預(yù)后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均低于造模前。E組、M組造模后、干預(yù)后均低于造模前,但干預(yù)后高于造模后。造模前各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,造模后D組、E組、P組和M組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均小于C組。干預(yù)后,D組、E組、P組和M組均小于C組,E組、
5、M組高于D組、P組,而D組和P組間,E組和M組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。逃避潛伏期:干預(yù)后C組和M組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但短于D組、P組及E組,而D組和P組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但長(zhǎng)于E組;平臺(tái)象限距離百分比:結(jié)果與逃避潛伏期的變化相反。大鼠腦海馬組織的Fos和nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元切面面積比:C組、P組和M組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但均低于D和E組,而E組高于D組;平均灰度值變化與陽(yáng)性神經(jīng)元切面面積比相反。nNOS-mRNA表達(dá)相對(duì)含量,NOS活性和
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