Fas、P53、Bcl-2參與多發(fā)性肌炎、皮肌炎凋亡機(jī)制的分子病理研究.pdf

1、目的：多發(fā)性肌炎(polymyositis，PM)、皮肌炎(dermatomy-ositis，DM)是一組獲得性、與自身免疫有關(guān)的骨骼肌疾病<'[1]>。急性或亞急性起病，四肢近端對稱性肌無力，多伴自發(fā)性肌痛、握痛，實(shí)驗(yàn)室檢查血清肌酸激酶(CK)升高，肌電圖多呈肌源性改變，部分DM患者呈肌源/神經(jīng)源性改變。骨骼肌活檢病理分析，PM病理像可見肌纖維變性、壞死、再生，肌內(nèi)膜、肌周膜和血管周圍炎性細(xì)胞浸潤。DM病理像以肌纖維束周萎縮為主要特征

2、，可見散在壞死、變性肌纖維，肌周膜、肌內(nèi)膜炎性細(xì)胞浸潤，血管周圍炎性細(xì)胞浸潤明顯。PM/DM的發(fā)病可能與病毒感染、遺傳因素、體液免疫、細(xì)胞免疫、MHC-Ⅰ分子的表達(dá)以及多種細(xì)胞因子有關(guān)<'[2，3]>。其中肌細(xì)胞上MHC-Ⅰ分子的過度表達(dá)可能是導(dǎo)致肌炎的一個(gè)啟動因素，而肌炎的持續(xù)與發(fā)展則與機(jī)體免疫應(yīng)答異常有關(guān)，DM以體液免疫為主，而PM則以細(xì)胞免疫為主，細(xì)胞因子等因素在PM/DM的發(fā)病過程中也發(fā)揮重要作用。近年關(guān)于凋亡機(jī)制是否參與肌細(xì)胞

3、的壞死及凋亡相關(guān)因子在PM/DM發(fā)病中的作用受到許多學(xué)者的關(guān)注<'[4，5，6]>。本課題通過免疫組織化學(xué)染色病理分析，研究促凋亡蛋白Fas、P53和抑制凋亡蛋白Bcl-2在PM/DM骨骼肌中的表達(dá)和分布，旨在分子病理水平探討以上凋亡相關(guān)因子在PM/DM發(fā)病過程中的作用。 方法： 1 根據(jù)2003年Dalakas MC制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇10例確診未經(jīng)激素治療的PM/DM患者的骨骼肌標(biāo)本作為研究組，其中PM4例、DM6例

4、；選擇病理診斷正常的骨骼肌標(biāo)本2例作為對照組。 2 冰凍連續(xù)切片、組織化學(xué)染色，抗P53、Fas和Bcl-2單克隆抗體免疫組織化學(xué)染色病理分析。 結(jié)果： 1 臨床病例分析 10例患者均為急性、亞急性起病，四肢近端肌無力伴自發(fā)性肌痛、握痛，DM伴皮疹。血清肌酸激酶(CK)呈輕～重度(148～13000U/L)升高。肌電圖多呈肌源性改變，2例DM患者呈肌源/神經(jīng)源性改變。 2 PM/DM組織化學(xué)病理分析PM：

5、HE、MGT可見大量變性和壞死肌纖維，肌內(nèi)膜、肌周膜血管周圍顯著炎細(xì)胞浸潤；可伴有NADH-TR，酶活性局限性減低；變性肌纖維和炎性細(xì)胞中酸性磷酸酶(Acid)活性增高。 DM：HE、MGT可見束周肌纖維萎縮，變性、壞死肌纖維散在，肌周膜、肌束膜、血管周圍明顯炎性細(xì)胞浸潤；NADH-TR束周萎縮肌纖維酶活性增高呈深染；酸性磷酸酶活性在束周萎縮肌纖維、炎性細(xì)胞中增高。 3 凋亡相關(guān)因子在PM/DM中的表達(dá)3．1 與對照組相

6、比，在PM壞死肌纖維的胞漿中可見促凋亡蛋白Fas、P53呈棕黃色陽性表達(dá)，在同源壞死肌纖維胞漿中可見Bcl-2蛋白也呈棕黃色陽性表達(dá)。PM的部分炎性細(xì)胞Bcl-2蛋白呈顯著表達(dá)(黃色)；Fas呈弱表達(dá)(淡黃色)，P53未見表達(dá)。 3．2 DM萎縮肌纖維胞漿中可見凋亡相關(guān)蛋白Fas、P53、Bcl-2呈棕黃色陽性表達(dá)。DM的炎性細(xì)胞中未見以上凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)。 結(jié)論： 1 PM、DM病理特點(diǎn)：PM可見大量變性和壞死

7、肌纖維，肌內(nèi)膜、肌周膜、血管周圍顯著炎細(xì)胞浸潤；束周萎縮是DM的典型病理特點(diǎn)。骨骼肌活檢、病理分析技術(shù)是診斷PM/DM的可靠方法。 2 PM壞死的肌纖維中可見促凋亡蛋白Fas、P53呈陽性表達(dá)，在同源壞死肌纖維中Bcl-2蛋白也呈陽性表達(dá)。推測促凋亡因子(Fas、P53)及抑凋亡因子(Bcl-2)參與了肌細(xì)胞壞死的病理演變過程，可能部分凋亡肌細(xì)胞最終演變?yōu)閴乃兰〖?xì)胞。 3 Fas、P53和Bcl-2在DM束周萎縮肌纖維胞