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1、第一部分胃癌組織中PLK1的表達(dá)及其意義 目的:研究Polo樣激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)在胃癌中的表達(dá)與各臨床病理特征、抑癌基因和腫瘤增殖活性的關(guān)系,探討PLK1在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用以及其臨床意義。 方法:運(yùn)用免疫組化的方法檢測(cè)正常胃組織20例,非典型增生組織21例,胃癌組織54例中PLK1、Ki67、P53的表達(dá)。 結(jié)果:PLK1在正常胃組織中表達(dá)均為陰性;21例非典型性增生有5例弱
2、陽(yáng)性;胃癌中48例陽(yáng)性(88.9%),其表達(dá)與年齡、性別、組織分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P>0.05),與浸潤(rùn)深度(x2=6.775,P<0.01)和臨床分期(χ2=9.009,P<.01)相關(guān)。在胃癌中,P53陽(yáng)性38例(70.4%),胃癌中PLK1表達(dá)與P53蛋白的積聚相關(guān)(χ2=6.664,P<.05)。胃癌中Ki67標(biāo)記指數(shù)均值為34.7±13.4%(X±s),范圍為10.3%-60.1%,PLK1的表達(dá)與Ki67呈正
3、相關(guān)(r=0.720,P<0.01)。 結(jié)論:PLK1在胃癌中高表達(dá),與腫瘤的增殖活性和抑癌基因相關(guān),在胃癌發(fā)生發(fā)展中PLK1起著重要作用,在胃癌診斷中可作為一種新的標(biāo)志物,在臨床治療和預(yù)后判定中有一定的指導(dǎo)意義。 第二部分PLK1小干擾RNA對(duì)胃癌細(xì)胞株SGC7901的影響 目的:聯(lián)合RNA干擾技術(shù)探討Polo樣激酶1在胃癌的發(fā)生發(fā)展中的作用及對(duì)臨床治療的指導(dǎo)作用。 方法:化學(xué)合成針對(duì)PLK1的小干擾R
4、NA(siRNA),轉(zhuǎn)染至胃癌細(xì)胞株SGC7901中,利用實(shí)時(shí)定量PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)、臺(tái)盼藍(lán)活性細(xì)胞計(jì)數(shù)和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)PLK1的基因表達(dá)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡的檢測(cè)。 結(jié)果:轉(zhuǎn)染PLK1-siRNA后,胃癌細(xì)胞中PLK1mRNA表達(dá)明顯下降,表達(dá)量相當(dāng)于空白組的39.2±0.9%(P<0.01);轉(zhuǎn)染48h后,細(xì)胞PLK1蛋白的表達(dá)下降;細(xì)胞增殖活性從轉(zhuǎn)染24h后明顯下降;細(xì)胞分裂周期發(fā)生變化,S期比例下降,阻滯在G2/M
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