CyclinB1與CyclinG1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其研究.pdf

1、目的:肺癌是我國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,而非小細(xì)胞肺癌占肺癌總量的85％以上,嚴(yán)重危害人類(lèi)的健康。非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的、多基因參與、多因素影響的過(guò)程。目前認(rèn)為癌基因的突變、激活和抑癌基因的失活是最重要的致癌因素。臨床研究表明,早期肺癌的預(yù)后較進(jìn)展期肺癌的預(yù)后好,因此對(duì)于肺癌若能夠早期發(fā)現(xiàn)早期治療無(wú)疑會(huì)使肺癌患者受益更多,并且對(duì)于提高生存率有很大幫助。因此尋找肺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中癌基因的標(biāo)記,探索癌基因激活與抑癌基因失活和肺癌

2、發(fā)生之間的關(guān)系,進(jìn)而建立簡(jiǎn)便易行、準(zhǔn)確性高、效果明顯的診斷和治療方法顯得尤為重要。
　　 近年來(lái)多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞周期調(diào)控的紊亂是細(xì)胞癌變的重要原因之一,而細(xì)胞周期蛋白是細(xì)胞周期調(diào)控的重要組成部分。細(xì)胞周期是每個(gè)細(xì)胞完成自身復(fù)制所經(jīng)歷的過(guò)程,是指細(xì)胞從一次分裂結(jié)束到下一次分裂終止的過(guò)程,完整的細(xì)胞周期往往在10到48小時(shí)完成。細(xì)胞周期分為四個(gè)時(shí)期,分別是G1期、S期、G2期、M期。細(xì)胞周期蛋白(Cyclins)是在細(xì)胞周期變化中的

3、特定時(shí)相短暫出現(xiàn)的基因表達(dá)產(chǎn)物,存在于多種生物真核細(xì)胞中,并且是細(xì)胞周期素依賴(lài)性激酶(Cyclin-dependent kinases,CDKs)的基本激活亞基,并且對(duì)細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期調(diào)控點(diǎn)(cell-cycle checkpoint)的調(diào)節(jié)起到關(guān)鍵性作用。到目前為止,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了從A-K十一族細(xì)胞周期蛋白,它們?cè)诩?xì)胞周期中出現(xiàn)的時(shí)相與作用也各不相同。其中CyclinB1作為細(xì)胞周期中調(diào)控G2-M期的重要蛋白,CyclinG1作為較晚發(fā)現(xiàn)

4、的細(xì)胞周期蛋白新成員,兩者與多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。但是關(guān)于二者在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)情況尚不完全清楚。本實(shí)驗(yàn)則通過(guò)研究CyclinB1、CyclinG1蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況,了解CyclinB1和CyclinG1蛋白與非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的關(guān)系,從而為NSCLC的診斷、預(yù)后判斷以及治療提供新的理論基礎(chǔ)。
　　 方法:本研究的標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院與河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院經(jīng)手術(shù)治療的肺部標(biāo)本,并經(jīng)臨床病理

5、確診,選擇正常肺組織作為對(duì)照組、NSCLC為實(shí)驗(yàn)組。所有入組患者術(shù)前均沒(méi)有進(jìn)行放療和(或)化療。手術(shù)方式為袖狀切除以及肺葉肺段切除,術(shù)中與術(shù)后證實(shí)無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。
　　 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法(S-P法)判斷CyclinB1和CyclinG1蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果評(píng)定以細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿染色呈現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表現(xiàn)。每組隨機(jī)選取5張切片,利用Image-pro plus6.0圖像分析軟件進(jìn)行分析,每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野(

6、10×40),測(cè)定每個(gè)視野下染色的平均光密度。以每例5個(gè)視野的平均光密度的平均值作為該例的測(cè)量值,計(jì)算免疫組織化學(xué)反應(yīng)陽(yáng)性顆粒的平均光密度值。然后將數(shù)據(jù)輸入SPSS17.0系統(tǒng),利用兩樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析以及q檢驗(yàn)(SNK)等進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。
　　 結(jié)果:
　　 1細(xì)胞周期蛋白表達(dá)水平
　　 1.1 CyclinB1在組織中的表達(dá)水平
　　 在45例非小細(xì)胞肺癌病例中35例CyclinB1表現(xiàn)為陽(yáng)性表

7、達(dá)(M=77.7％);正常對(duì)照組10例中2例表現(xiàn)為陽(yáng)性(M=20.0％)。實(shí)驗(yàn)組明顯高于正常對(duì)照組(p＜0.01);肺鱗癌組陽(yáng)性表達(dá)率17/22(M=77.3％);肺腺癌組陽(yáng)性表達(dá)率10/13(M=76.9％);肺腺鱗癌組陽(yáng)性表達(dá)率8/10(M=80.0％),三組標(biāo)本進(jìn)行平均光密度值對(duì)比,發(fā)現(xiàn)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 1.2 CyclinG1在組織中的表達(dá)水平
　　 在45例非小細(xì)胞肺癌病例中38例Cycl

8、inG1表現(xiàn)為陽(yáng)性表達(dá)(M=84.4％);正常對(duì)照組10例中3例表現(xiàn)為陽(yáng)性(M=30.0％)。實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組(p＜0.01);肺鱗癌組陽(yáng)性表達(dá)率19/22(M=86.4％);肺腺癌組陽(yáng)性表達(dá)率12/13(M=92.3％);肺腺鱗癌組陽(yáng)性表達(dá)率7/10(M=70.0％),三組兩兩比較沒(méi)有相關(guān)性。
　　 2 CyclinB1、CyclinG1的表達(dá)與性別,年齡(60歲以上組與60歲以下組)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3 C

9、yclinB1的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的組織學(xué)分級(jí)具有顯著差異。CyclinG1的表達(dá):高分化組與中分化組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05),中分化組與低分化組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1 CyclinB1與CyclinG1在成人非小細(xì)胞肺癌中存在過(guò)度表達(dá),并且在細(xì)胞周期中異常分布,這說(shuō)明兩者可能參與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生與發(fā)展。
　　 2 CyclinB1和CyclinG1表達(dá)水平與腫瘤的