Migfilin在CyclinB1誘導(dǎo)的食管鱗癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用.pdf

1、細胞的生長環(huán)境，包括細胞外基質(zhì)和相鄰的細胞。細胞外基質(zhì)的生物學(xué)功能包括影響細胞的生長、存活與死亡；決定細胞的形狀；控制細胞的分化；參與細胞的遷移。這些重要的生物學(xué)功能主要由細胞粘附和細胞外基質(zhì)來完成。Migfilin是一細胞骨架蛋白，廣泛分布于細胞與細胞、細胞與基質(zhì)的粘附中。Migfilin是由FBLIM1（Filamin binding LIM protein 1）基因編碼的蛋白。人FBLIM1基因位于一號染色體斷臂3區(qū)6帶。編碼的蛋

2、白Migfilin分子量為46kD。Migfilin的N端含有與Filamin發(fā)生相互作用的結(jié)構(gòu)域，中間是一段脯氨酸富集區(qū)，在C端包含三個LIM結(jié)構(gòu)域。LIM結(jié)構(gòu)域是50多個半胱氨酸殘基折疊而成的兩個鋅指結(jié)構(gòu)。但是它在CyclinB1誘導(dǎo)的食管鱗癌細胞侵襲和轉(zhuǎn)移中扮演了怎樣的角色還不清楚。本文主要研究Migfilin與CyclinB1誘導(dǎo)的食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系。有研究人員發(fā)現(xiàn)CyclinB1誘導(dǎo)食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移的主要機制是誘導(dǎo)NF-k

3、B依賴性的EMT的發(fā)生，Migfilin作為細胞骨架蛋白，很有可能與CyclinB1誘導(dǎo)的食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)系。
　　 方法：
　　 首先，通過RT-PCR，檢測Migfilin在CyclinB1高表達、CyclinB1敲降食管鱗癌細胞系中mRNA水平的變化。第二，通過Western Blot，檢測Migfilin在CyclinB1高表達、CyclinB1敲降食管鱗癌細胞系中蛋白水平的變化。第三，通過免疫熒光，檢測Mi

4、gfilin在CyclinB1高表達、CyclinB1敲降食管鱗癌細胞系中亞細胞定位的變化。第四，通過RNA干擾技術(shù)，敲降CyclinB1高表達食管鱗癌細胞系中Migfilin的表達。敲降Migfilin后，通過Transwell觀察Migfilin對CyclinB1高表達食管鱗癌細胞系侵襲能力的影響。再通過克隆形成實驗，觀察Migfilin對CyclinB1高表達食管鱗癌細胞系單個細胞成瘤能力的影響。
　　 結(jié)果：
　　

5、 Migfilin作為一種細胞骨架蛋白，在CyclinB1誘導(dǎo)的食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移中扮演了重要的角色。雖然在信使RNA水平上CyclinB1和Migfilin的表達量沒有呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性，但是在蛋白水平上CyclinB1和Migfilin的表達量呈現(xiàn)正相關(guān)。CyclinB1作為一細胞周期蛋白，Migfilin的表達隨著CyclinB1的周期變化而變化。并且在CyclinB1誘導(dǎo)的食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移中，隨著Migfilin表達量的減少，會使

6、食管鱗癌細胞的侵襲能力、單個細胞的成瘤能力下降。
　　 結(jié)論：
　　 我們發(fā)現(xiàn)，在蛋白水平，于Cyclin B1高表達和Cyclin B1敲降的食管鱗癌細胞系中，Migfilin和CyclinB1的表達具有相關(guān)性。免疫熒光結(jié)果顯示出，在Cyclin B1高表達和Cyclin B1敲降食管鱗癌細胞系中，Migfilin和CyclinB1存在共定位的現(xiàn)象。敲降Migfilin后能夠使CyclinB1高表達的食管鱗癌細胞系的侵