Stefin A在食管鱗癌組織和細胞中作用的初步研究.pdf

1、惡性腫瘤最重要的特征在于能侵襲周圍組織并發(fā)生轉(zhuǎn)移。腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移通常是造成腫瘤患者死亡的主要原因。組織蛋白酶B（cathepsin B）參與腫瘤從非惡性狀態(tài)進展到惡性狀態(tài)，以及腫瘤生長、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成。作為組織蛋白酶 B的內(nèi)源性抑制劑，stefin A 表達水平與腫瘤惡性進展的逆向關(guān)系的報道越來越多。 本研究的目的是分析stefin A在人食管鱗癌組織和細胞中的作用，并進一步評價stefin A用于腫瘤治療的可能性。對62

2、例配對食管鱗癌組織標本的免疫組織化學和半定量RT-PCR分析表明，與配對正常食管粘膜上皮組織相比，stefin A表達明顯下調(diào)，這與以往的cDNA微陣列的分析結(jié)果一致。共聚焦成像分析證實了stefin A 和組織蛋白酶 B的共定位。 隨后，我們穩(wěn)定轉(zhuǎn)染stefin A cDNA到人EC9706食管鱗癌細胞，發(fā)現(xiàn)細胞變大，生長減慢，組織蛋白酶 B活性明顯降低，Matrigel侵襲被明顯抑制，與Matrigel的粘附得到增強，緩解了

3、順鉑誘導的凋亡。同時，我們也評價了組織蛋白酶 B特異性抑制劑CA074Me對EC9706細胞的效果。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，10mM CA074Me也明顯抑制了EC9706細胞的組織蛋白酶 B活性和Matrigel侵襲。聯(lián)合10mM的CA074Me與stefin A轉(zhuǎn)染進一步降低了組織蛋白酶 B的活性和抑制了Matrigel侵襲。體內(nèi)實驗表明，過表達stefin A延緩了EC9706細胞在裸鼠的增殖；在裸鼠接種的腫瘤中明顯減低VIII因子染