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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討β-catenin在食管癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用
方法:在人食管癌Eca-109細(xì)胞中轉(zhuǎn)染有效的β-catenin基因siRNA干擾片段后,:應(yīng)用:①CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察沉默此基因?qū)κ彻馨┘?xì)胞的增殖能力的影響;②Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察沉默此基因?qū)κ彻馨┑那忠u能力的影響;③Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察沉默此基因?qū)κ彻馨┑倪w移能力的影響;④Western Blotting方法檢測(cè)β-catenin
2、表達(dá)的下調(diào)是否對(duì)WISP2及TCF4、E-cadherin蛋白表達(dá)情況產(chǎn)生影響。
結(jié)果:
1. CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,β-catenin干擾組細(xì)胞增殖能力低于空白對(duì)照及無(wú)意義片段的陰性對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而空白對(duì)照組與陰性對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2. Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示,β-catenin干擾組細(xì)胞的遷移能力及侵襲能力均低于
3、空白對(duì)照及陰性對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3. Western Blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,WISP2蛋白在β-catenin干擾組中表達(dá)量高于空白對(duì)照及陰性對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);E-cadherin蛋白在β-catenin干擾組中的表達(dá)量也高于空白對(duì)照及陰性對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而TCF4蛋白在β-catenin干擾組中表達(dá)量低于正常對(duì)照及陰性對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
4、<0.05)。
結(jié)論:
1.下調(diào)β-catenin,能夠有效的抑制食管癌細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移能力,β-catenin基因有望成為食管癌治療潛在治療靶點(diǎn)。
2.下調(diào)β-catenin后,Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路的下游基因TCF4的表達(dá)下調(diào)。
3.下調(diào)β-catenin后,E-cadherin和WISP2基因表達(dá)上調(diào)。
4.β-catenin可能通過(guò)促進(jìn)TCF4的表達(dá)進(jìn)而抑制
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