小窩蛋白-1在食管癌轉移中的作用及其機制的研究.pdf

1、研究目的：
　　在細胞學水平檢測小窩蛋白-1在食管癌轉移中的作用并初步探索Cav-1與Rho/ROCK信號通路在食管癌進展中的相互作用。
　　研究方法：
　　1、用含10％胎牛血清，1%青霉素和1%鏈霉素的高糖 DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人食管癌細胞株EC109、ECa109、TE1、TE13。
　　2、Western blot方法檢測細胞株中Cav-1、pY14Cav-1的表達水平。
　　3、劃痕試驗檢測四株細胞

2、的遷移能力。
　　4、Cav-1 siRNA轉染食管癌細胞株（EC109、TE1、TE13），轉染試驗分為Cav-1 siRNA1組， Cav-1 siRNA2組，陰性對照組、空白對照組；Western blot檢測轉染Cav-1 siRNA的效果。
　　5、ROCK抑制劑Y-27632以不同濃度作用于食管癌細胞（EC109、ECa109、TE1、TE13）同時篩選最佳作用濃度。
　　6、Transwell方法檢測轉染

3、前后及藥物作用前后細胞遷移、侵襲能力的變化。
　　結果：
　　1、Cav-1在食管癌細胞株（EC109、ECa109、TE1、TE13）中均有表達，其表達水平不一。pY14Cav-1僅在細胞株TE1、TE13中表達。
　　2、劃痕試驗結果顯示表達 pY14Cav-1的細胞株 TE1、TE13的遷移能力明顯強于不表pY14Cav-1的細胞株EC109、ECa109。
　　3、轉染Cav-1 siRNA使細胞株中Ca

4、v-1表達水平降低后，細胞遷移、侵襲能力隨之降低。4、ROCK抑制劑Y-27632以10umol/L濃度作用于細胞1小時，細胞EC109、ECa109中Cav-1表達水平降低，細胞遷移、侵襲能力同時降低。Y-27632對細胞中Cav-1表達水平的降低及細胞遷移、侵襲能力的抑制并不呈濃度依賴。
　　結論：
　　1、在EC109、ECa109、TE1和TE13四株細胞中， Cav-1的表達水平和細胞的分化程度無關。
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