Hsp90及NO在糖皮質(zhì)激素性青光眼發(fā)病中的作用.pdf

1、目的探討Hsp90和NO在糖皮質(zhì)激素性青光眼發(fā)病中的作用，為今后對糖皮質(zhì)激素性青光眼的進一步研究和治療提供理論依據(jù)。方法實驗性家兔隨機分為實驗組和對照組，實驗組隨機分成實驗A組、B組、C組和D組，每組5只，隔日定時左眼結(jié)膜下注射地塞米松0．5mg(0．2m1)，A組用藥兩周后直接進行指標(biāo)檢測，B組用藥兩周后停止用藥直至眼壓降至正常且連續(xù)觀察2周無下降趨勢后進行各種指標(biāo)測定，C組和D組繼續(xù)隔日定時左眼結(jié)膜下注射地塞米松0．5mg(0．2m

2、1)共四周。四周后C組直接進行各項指標(biāo)測定，D組停藥觀察眼壓變化后進行指標(biāo)測定。對照組5只，隔日定時左眼結(jié)膜下注射同容積生理鹽水，隔日定時測眼壓。于實驗各時段抽取房水，測量房水中NO的含量和NOS的活性。在顯微鏡下取材小梁網(wǎng)，組織勻漿取上清液測定透明質(zhì)酸、層粘連蛋白的含量。并將保留了部分角膜、虹膜、鞏膜的小梁網(wǎng)用甲醛固定，分別進行HE染色和Hsp90免疫熒光分析。結(jié)果1．用藥4次(8天)后有近一半實驗家兔出現(xiàn)眼壓增高，兩周后全部眼壓增高

3、。造模成功率為百分之百。2．實驗組眼壓增加(P<0．05)，并隨著用藥時間延長而增高明顯(P<0．01)，短期用藥后停藥眼壓可以逐漸恢復(fù)(P>0．05)，但長期用藥后停藥眼壓不能恢復(fù)(P<0．01)。3．房水中NO含量與eNOS活性的變化基本一致，A、C組房水中NO的含量和eNOS活性明顯降低(P<0．05)，B組NO的含量和eNOS活性與對照組無明顯差異(P>0．05)，D組房水中NO的含量與對照組和C組都有明顯差異(P<0．05)，

4、而eNOS的活性與對照組無明顯差異(P>0．05)。4．總NOS和iNOS的活性在整個實驗過程中無明顯波動(P>0．05)。5小梁組織中HA與LN的含量也有明顯變化，A組HA含量明顯下降(P<0．05)，LN含量與對照組差別無顯著性(P>0．05)；B組HA與LN含量與對照組差別均無顯著性(P>0．05)；C、D組HA含量均明顯下降(P<0．05)，LN含量均明顯上升(P<0．05)；兩組差別無顯著性(P>0．05)。6小梁組織中Hsp

5、90在實驗過程中波動明顯，與激素的使用有明顯關(guān)系。A組Hsp90含量明顯降低(P<0．05)，B組Hsp90含量與對照組無明顯差異(P>0．05)，C組Hsp90含量明顯降低(P<0．05)，D組Hsp90含量與對照組和C組都有明顯差異(P<0．05)。7．Hsp90的變化與NO含量呈明顯正相關(guān)(r=0．67，P<0．05)，NO的含量與eNOS的活性呈明顯正相關(guān)(r：0．50P<0．05)，而NO的含量與眼壓變化呈明顯負(fù)相關(guān)(r=．0

6、．74，P<0．05)，與細(xì)胞外基質(zhì)HA的含量呈明顯正相關(guān)(r=0．78，P<0．05)，與細(xì)胞外基質(zhì)LN的含量呈明顯負(fù)相關(guān)(r=．0．58，P<0．05)。結(jié)論1．局部使用地塞米松2周可以引起實驗家兔眼壓升高，及時停藥眼壓可以恢復(fù)，但繼續(xù)用藥可以使眼壓繼續(xù)升高，而且停藥后眼壓不能恢復(fù)正常。2．Hsp90、eNOS、NO的含量或活性在整個實驗過程中變化基本一致，在激素的使用過程中含量或活性下降，停藥后逐漸恢復(fù)，但Hsp90和NO的含量在