Girdin在食管鱗癌中的表達(dá)及功能的研究.pdf

1、目的：
　　檢測Girdin在食管鱗癌組織中的表達(dá)，及其與食管癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。同時(shí)以食管鱗癌ECA109細(xì)胞株為研究對象，用針對Girdin的siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞抑制Girdin的表達(dá)，探討其對ECA109細(xì)胞增殖及侵襲力的影響。
　　方法：
　　1、采用免疫組織化學(xué)法檢測94例食管癌和78例食管癌旁組織中Girdin的表達(dá)。對食管鱗癌組織中Girdin的表達(dá)與臨床病理因素及預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2、　　2、以食管癌ECA109細(xì)胞為研究對象，設(shè)計(jì)針對Girdin的siRNA，設(shè)立陰性對照組和空白對照組，將siRNA轉(zhuǎn)染入ECA109細(xì)胞，RT-PCR檢測siRNA轉(zhuǎn)染前后Girdin mRNA表達(dá)水平的變化。
　　3、采用MTT法觀察各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的增殖情況。
　　4、侵襲實(shí)驗(yàn)檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的侵襲力變化。
　　結(jié)果：
　　1、Girdin在食管鱗癌組織中高表達(dá)，而在癌旁組織中低表達(dá)，兩者有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3、Girdin高表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤部位無明顯相關(guān)性(P＞0.05)，但與T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)。Girdin蛋白陰性表達(dá)者5年生存率顯著高于陽性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。單因素分析顯示食管癌患者5年生存率與T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、Girdin表達(dá)水平相關(guān)(P＜0.05)。多因素分析顯示Girdin表達(dá)水平及TNM分期為食管癌患者5年生存率的獨(dú)立影響因素。
　　2、轉(zhuǎn)染后24h，RT-PCR檢測結(jié)果顯示

4、，siRNA轉(zhuǎn)染組對GirdinmRNA的抑制率為76.52％，與其余兩組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　3、MTT結(jié)果顯示，在轉(zhuǎn)染24h、48h、72h后，細(xì)胞增殖抑制率分別為26.4％、37.24％、28.47％，較空白對照組明顯降低，差異有顯著意義(P＜0.01)。
　　4、侵襲實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組穿膜細(xì)胞數(shù)（0.072±0.005），明顯少于空白組（0.260±0.012）及陰性對照組（0.238±0.00