人卵巢癌細胞建系及與DC融合誘導CTL活性的研究.pdf

1、目的從人卵巢癌組織建立卵巢癌細胞系，以研究卵巢癌細胞的生物學特性，并探討卵巢癌細胞與樹突狀細胞的融合疫苗在體外抗腫瘤的免疫反應。 方法取手術切除的卵巢癌組織，進行組織塊培養(yǎng)，待長滿90％匯合面后消化傳代培養(yǎng)，并進行卵巢癌細胞形態(tài)學、生長動力學、裸鼠致瘤性及免疫組化等生物學特性研究；用PEG法將卵巢癌細胞與樹突狀細胞融合，在含10％FCS，GM-CSF、IL-4的RPMI-1640條件下培養(yǎng)7d，然后與CA-125特異性T細胞共培

2、養(yǎng)24hr，用細胞內染色法、MTT法及流式細胞術分析檢測融合細胞誘導CTL的活性。 結果該卵巢癌細胞系已在體外培養(yǎng)生存20個月，傳90余代，命名為湖南卵巢癌細胞系1號(HOC1)，其生物學特性顯示：該細胞系體外生長的倍增時間為47.2h；軟瓊脂集落形成率為18.5％；接種至裸鼠后具100％致瘤性；染色體核型分析為非整倍體，眾數(shù)為74～92條；透射電鏡下可觀察到卵巢癌細胞表面含有豐富的微絨毛，胞漿內含有豐富的核糖體，具有卵巢癌細胞