人卵巢癌細(xì)胞建系及與DC融合誘導(dǎo)CTL活性的研究.pdf

1、目的從人卵巢癌組織建立卵巢癌細(xì)胞系，以研究卵巢癌細(xì)胞的生物學(xué)特性，并探討卵巢癌細(xì)胞與樹(shù)突狀細(xì)胞的融合疫苗在體外抗腫瘤的免疫反應(yīng)。 方法取手術(shù)切除的卵巢癌組織，進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，待長(zhǎng)滿90％匯合面后消化傳代培養(yǎng)，并進(jìn)行卵巢癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)、裸鼠致瘤性及免疫組化等生物學(xué)特性研究；用PEG法將卵巢癌細(xì)胞與樹(shù)突狀細(xì)胞融合，在含10％FCS，GM-CSF、IL-4的RPMI-1640條件下培養(yǎng)7d，然后與CA-125特異性T細(xì)胞共培

2、養(yǎng)24hr，用細(xì)胞內(nèi)染色法、MTT法及流式細(xì)胞術(shù)分析檢測(cè)融合細(xì)胞誘導(dǎo)CTL的活性。 結(jié)果該卵巢癌細(xì)胞系已在體外培養(yǎng)生存20個(gè)月，傳90余代，命名為湖南卵巢癌細(xì)胞系1號(hào)(HOC1)，其生物學(xué)特性顯示：該細(xì)胞系體外生長(zhǎng)的倍增時(shí)間為47.2h；軟瓊脂集落形成率為18.5％；接種至裸鼠后具100％致瘤性；染色體核型分析為非整倍體，眾數(shù)為74～92條；透射電鏡下可觀察到卵巢癌細(xì)胞表面含有豐富的微絨毛，胞漿內(nèi)含有豐富的核糖體，具有卵巢癌細(xì)胞