肉雞腹水綜合征的營養(yǎng)調(diào)控及其機理研究.pdf

1、本研究共進行四個試驗，研究了營養(yǎng)對肉雞腹水綜合征(AscitesSyndrome，AS)的影響及可能機理。在成功建立肉雞AS模型的基礎(chǔ)上，先確定缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)與肉雞AS的關(guān)系，再分別考慮飼糧Vc、飼糧能量水平和來源對0-21d肉雞AS的影響，從肉雞的生長速度、養(yǎng)分消化利用率、血液生化指標(biāo)、機體氧化和抗氧化能力、肉雞單位代謝體重耗氧量、HIF-1α基因表達等方面來探索營養(yǎng)對肉雞AS的影響及其機理。 試驗一AS對

2、肉雞生產(chǎn)性能和營養(yǎng)物質(zhì)利用率及血液參數(shù)的影響 本試驗旨在建立肉雞AS模型，為進一步研究肉雞AS的營養(yǎng)調(diào)控及其機理打下基礎(chǔ)。選1d艾維茵(AA)肉雞120只，隨機分為對照和試驗二個組，每組6個重復(fù)，每重復(fù)10只雞。試驗組采用低溫(室內(nèi)溫度0-21d為15℃左右，籠內(nèi)溫度0-7d為25℃左右，7-21d為20℃左右)和飼糧添加1.5mg/kg3,3'，5-三碘甲狀原氨酸(3,3'，5-triiodothyronine，T3)的方法誘

3、導(dǎo)肉雞產(chǎn)生AS，對照組肉雞在正常環(huán)境溫度條件下飼喂不含T3的相同基礎(chǔ)飼糧。試驗期為21d。結(jié)果表明：①低溫(Lowambienttemperature,LAT)和T3能成功誘發(fā)0-21d肉雞AS，其發(fā)病率和死亡率分別高達66.7％和23.3％，能顯著降低生產(chǎn)性能(p＜0.05)，提高心臟指數(shù)(p＜0.05)；②試驗組7d肉雞血液紅細(xì)胞數(shù)量(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細(xì)胞壓積(HCT)和14d肉雞血液紅細(xì)胞分布寬度(RDW)顯著

4、高于對照組(p＜0.05)；21d肉雞血液平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白(MCH)顯著(p＜0.05)低于對照組；③AS具有降低14和21d肉雞血糖血脂的功能，某些指標(biāo)達顯著(p＜0.05)或極顯著(p＜0.01)水平；④AS能使14和21d肉雞血液谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、白蛋白/球蛋白、乳酸脫氫酶(LDH)有升高的趨勢，ALT在21d差異極顯著(p＜0.01)；⑤試驗組肉雞在第二周齡時對能量、粗脂肪、粗蛋白、鈣、

5、磷的利用率均極顯著(p＜0.01)或顯著(p＜0.05)低于對照組，第三周時，試驗組肉雞除對粗蛋白的利用率沒有達到顯著水平外，其他均極顯著(p＜0.01)或顯著(p＜0.05)低于對照組；⑥14d肉雞AS的發(fā)病程度與血清GLU呈顯著(p＜0.05)負(fù)相關(guān)，21d肉雞AS的發(fā)病程度與體重(BW)及血清GLU、TG和VLDL呈極顯著(p＜0.01)或顯著(p＜0.05)負(fù)相關(guān)，與血清ALT呈極顯著正相關(guān)(p＜0.01)。通過以上指標(biāo)可看出，

6、本試驗肉雞AS模型的建立是成功的。 試驗二AS肉雞HIF-1αcDNA的克隆及表達 本試驗旨在探索AS肉雞體內(nèi)是否存在HIF-1α基因，并證明HIF-1α基因與肉雞AS的發(fā)生密切相關(guān)。從21dAS肉雞肺臟中提取RNA，根據(jù)雞胚心室肌細(xì)胞HIF-1α基因序列(登錄號為NM204297)設(shè)計引物，采用RT-PCR技術(shù)進行cDNA擴增，擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離、純化、回收后與載體pMD18-T連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α，篩

7、選陽性克隆，測序，并采用RT-PCR技術(shù)檢測4只正常肉雞和4只AS患雞肺臟HIF-1αmRNA。結(jié)果表明：已成功克隆的陽性重組子經(jīng)測序鑒定其片段大小與預(yù)期大小完全一致，為1，576bp。利用BLASTn和BLASTp分析比較表明，該cDNA及其推導(dǎo)的氨基酸序列與雞胚HIF-1αcDNA和氨基酸序列分別具有99％和98％的一致性，但有10個堿基突變和6個氨基酸突變。AS肉雞肺臟HIF-1αmRNA表達豐度比正常肉雞高39％，達到極顯著水平

8、(p＜0.01)。本試驗表明，HIF-1α基因與肉雞AS發(fā)生密切相關(guān)。 試驗三飼糧添加Vc對肉雞AS的影響及其機理 本試驗探討了飼糧添加Vc對肉雞AS的影響及其機制。試驗采用2×5因子設(shè)計，研究正常和T3誘導(dǎo)2種條件下，5個不同梯度飼糧Vc水平對肉雞生產(chǎn)性能、營養(yǎng)物質(zhì)利用率、血液生化指標(biāo)、機體氧化和抗氧化功能、HIF-1αmRNA表達、AS發(fā)病率及死亡率的影響。300只1dAA肉雞隨機分配到10個處理中，每處理3重復(fù)，試

9、驗期為21d。結(jié)果表明：①在肉雞飼糧中添加Vc可以顯著降低肉雞心臟指數(shù)(p＜0.05)，AS發(fā)病率大幅度下降；②飼糧Vc可增進肉雞機體的健康狀況，作用的大小與劑量有關(guān)。900mg/kgVc可將肉雞的全期增重提高5.2％、極顯著降低肉雞肝臟MDA的含量(p＜0.01)、顯著增加肺臟T-AOC的水平(p＜0.05)，飼糧Vc均可顯著(p＜0.05)或極顯著(p＜0.01)降低肺臟HIF-1αmRNA表達量和血液LDH的活性；③肉雞采食含T3

10、飼糧可極顯著降低肉雞0-21d各階段和全期的平均增重(p＜0.01)，極顯著降低肉雞對DM、能量和粗脂肪的利用率(p＜0.01)，極顯著增加肉雞血液乳酸和MDA的含量(p＜0.01)，使肝肺臟MDA極顯著增加(p＜0.01)，T-AOC極顯著下降(p＜0.01)，使肺臟Vc含量、肺臟HIF-1αmRNA表達量和心臟指數(shù)增加達到顯著(p＜0.05)和極顯著水平(p＜0.05)，使肉雞AS發(fā)病率提高80.7％，AS死亡率大幅度增加。從本試驗

11、結(jié)果來看，肉雞飼糧中添加Vc對肉雞AS有一定的防治作用，以900mg/kg的添加劑量效果最佳；Vc能夠防治肉雞AS的原因是提高了機體抗氧化能力、降低了血液LDH的活性和乳酸的積蓄、降低了HIF-1α基因的表達量。 試驗四飼糧能量水平和來源對肉雞AS的影響及其機理 本試驗探討了飼糧能量水平和來源對肉雞AS的影響及其可能的機制。試驗采用2×2×2因子設(shè)計，設(shè)2個能量水平(3.3Mcal/kg；2.8Mcal/kg)、2種能量

12、來源(碳水化合物和大豆油)和2種肉雞狀態(tài)(正常狀態(tài)和T3誘導(dǎo)下AS狀態(tài))。320只1dAA肉雞隨機分配到8個處理中，每處理4重復(fù)，試驗期為21d。結(jié)果表明：①相對于低能飼糧(2.8Mcal/kg)，肉雞采食高能飼糧(3.3Mcal/kg)極顯著增加了肉雞的心臟指數(shù)(p＜0.01)、AS發(fā)病率(p＜0.01)、全期增重(p＜0.01)和單位代謝體重耗氧量 (p＜0.01)，顯著降低肝臟SOD的濃度(p＜0.05)，肝臟T-AOC下

13、降了12.5％，MDA增加了20.4％，肺臟HIF-1αmRNA增加了14％；②飼糧脂肪水平和能量來源對以上指標(biāo)均無顯著性影響(p＞0.05)；③在T3誘導(dǎo)條件下，肉雞心臟指數(shù)(p＜0.01)和肺臟HIF-1αmRNA(p＜0.01)顯著增加，全期增重極顯著降低(p＜0.01)，肝臟T-AOC下降了6.7％，MDA增加了15.1％；④能量和T3對肉雞心臟指數(shù)具有極顯著的互作效應(yīng)(p＜0.01)，表現(xiàn)為高能飼糧對肉雞HI提高的幅度在T3條

14、件下更加明顯。從以上試驗結(jié)果可看出，高能飼糧(3.3Mcal/kg)可促進肉雞AS的發(fā)生，其機理可能是提高了肉雞的生長速度、增加了機體的耗氧量、促進了HIF-1α基因的表達。該效應(yīng)在T3誘導(dǎo)下更加明顯；飼糧能量來源對肉雞AS無明顯影響。 上述試驗結(jié)果表明，當(dāng)肉雞發(fā)生AS時，HIF-1α基因表達增加；飼糧添加900mg/kg的Vc可以有效預(yù)防肉雞AS的發(fā)生，其原因是提高肉雞機體抗氧化能力和降低HIF-1α基因表達；高能飼糧(3.3