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文檔簡介
1、目的:探討腹腔鏡二氧化碳(CO2)氣腹環(huán)境對人宮頸癌 Hela細胞生長的影響,及CO2氣腹環(huán)境作用后Hela細胞對卡鉑敏感性的影響。
方法:以人宮頸癌 Hela細胞株為研究對象,將人宮頸癌 Hela細胞置于含5%CO2、溫度為37℃細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育,待細胞傳代2~3代后,取處于對數(shù)生長期 Hela細胞,調(diào)整細胞密度為1.0×l06/m1,接種至細胞培養(yǎng)瓶內(nèi),放入細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24 h,使細胞貼壁生長。細胞分為4組:對照組
2、、CO2組、卡鉑組、CO2+卡鉑組。對照組放入細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),連續(xù)72 h;卡鉑組細胞培養(yǎng)24 h后換用含20 ug/ml卡鉑的培養(yǎng)液,置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)靜置培養(yǎng)48 h;CO2組細胞置于醫(yī)用無菌引流袋內(nèi)封固,將醫(yī)用無菌引流管與氣腹機相連接,氣腹機壓力調(diào)至12 mmHg通入99.5%醫(yī)用CO2氣體,持續(xù)2 h,然后置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)72 h;CO2+卡鉑組在上述99.5%醫(yī)用CO2氣體處理后24 h換用含20 ug/m1卡鉑的
3、培養(yǎng)液,置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)靜置培養(yǎng)48 h。利用 CCK8法檢測各組細胞的增殖活性;流式細胞儀PI染色分析各組細胞生長周期;及Annexin V-FITC檢測細胞早期凋亡率。
結(jié)果:應用統(tǒng)計軟件 SPSS13.0對所得數(shù)據(jù)進行分析,統(tǒng)計方法為析因設(shè)計方差分析和t檢驗,P<0.05為差異有顯著性。結(jié)果表明:1 CO2+卡鉑組與對照組比較,模擬CO2氣腹環(huán)境后卡鉑對Hela細胞生長仍有明顯抑制作用。2 Hela細胞置于模擬CO2
4、氣腹環(huán)境后,與未經(jīng) CO2處理組細胞比較,CO2處理組Hela細胞增殖抑制率與早期凋亡率均明顯下降,但細胞周期無明顯差異。3加卡鉑各組與不加卡鉑各組細胞比較,卡鉑處理組 Hela細胞增殖抑制率上升明顯,并使腫瘤細胞停滯于 S期,G1、G2期細胞明顯減少,凋亡指數(shù)明顯增加。4 CO2+卡鉑組與卡鉑組比較,二者細胞增殖抑制率及早期細胞凋亡率均未見明顯差異,前者 G0/G1期細胞減少,差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)論:1 CO2氣腹環(huán)境能促
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