曲古霉素A對乏氧宮頸癌Hela細胞放射敏感性影響的研究.pdf

1、 分類號 密級 UDC 編號 碩 士 學 位 論 文 曲古霉素 A 對乏氧宮頸癌 Hela 細胞放射敏感性 影響的研究 學 位 申 請 人： 人： 余娟娟 指 導 教 師： 師： 田曉予 教授 學 科 專 業(yè)

2、： 業(yè)： 婦科腫瘤的基礎(chǔ)與臨床 學 位 類 別： 別： 醫(yī)學 2011 年 5 月 摘 要 I 論文題目： 論文題目： 曲古霉素 曲古霉素 A 對乏氧 對乏氧宮頸癌 宮頸癌 Hela 細胞放射敏感性影響的 細胞放射敏感性影響的 研究 研究 專 業(yè)： 業(yè)： 婦科腫瘤的基礎(chǔ)與臨床 婦科腫瘤的基礎(chǔ)與臨床

3、 研 究 生： 生： 余娟娟 余娟娟 指導教師： 指導教師： 田曉予 田曉予 教授 教授 摘 要 目的： 目的：以宮頸癌乏氧 Hela 細胞為研究對象，通過與常氧 Hela 細胞對比，研究不同劑量的放射線及組蛋白去乙?；?/p>

4、酶抑制劑曲古霉素 A(trichostatin A，TSA)對不同狀態(tài)下 Hela 細胞增殖的抑制作用，探討了 TSA 作為一種放療增敏劑對不同狀態(tài)下 Hela 細胞放射敏感性的影響，并進一步研究了其放射增敏的分子機制，為宮頸癌的放射治療提供新的方向。 方法： 方法： 1．體外通氮法創(chuàng)建腫瘤細胞乏氧模型； 2．細胞抑制率分析：應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(methylthiazolyl tetrazolium， MTT)快速比色法檢測不同濃度 T

5、SA 對常氧及乏氧狀態(tài)下 Hela 細胞生長的影響；分別計算兩種狀態(tài)下的 50%細胞致死濃度(the 50% inhibition concentration， IC50)和 10%細胞致死濃度(the 10% inhibition concentration，IC10)； 3．細胞存活分數(shù)測定：應(yīng)用 MTT 法檢測 IC10 濃度的 TSA 對常氧 Hela 細胞不同照射方式后細胞存活分數(shù)的影響；利用克隆形成法測定 IC10 濃度的

6、TSA對常氧及乏氧狀態(tài)下 Hela 細胞細胞存活分數(shù)的影響； 4．單擊多靶模型擬合細胞存活曲線，計算放射增敏比(sensitive enhencement ratio，SER)； 5．采用免疫細胞化學法測定不同狀態(tài)下 TSA 處理前后 Hela 細胞中乏氧誘導 因 子 -1α(Hypoxia-inducible Factor-1 alpha ， HIF-1α) 和 血 管 內(nèi) 皮 生 長 因 子(Vascular Endothelial

7、 Growth Factor，VEGF)蛋白的表達。 結(jié)果： 結(jié)果： 1．TSA 可明顯抑制常氧及乏氧狀態(tài)下 Hela 細胞的生長，同時可以改變細胞的形態(tài)。隨著 TSA 作用時間的延長和作用濃度的增大，抑制作用增強，呈現(xiàn)一定的時間-濃度依賴性。TSA 對常氧 Hela 細胞的 IC50 和 IC10 分別為0.587µ mol/L 和 0.031µ mol/L；TSA 對乏氧 Hela 細胞的 IC50 和 IC10