2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:我們的前期研究發(fā)現(xiàn):活動期SLE患者外周血中CD4<'+>T細胞穿孔素mRNA的表達和蛋白的含量明顯的增高,同時也發(fā)現(xiàn)CD4<'+>T細胞穿孔素基因啟動子區(qū)域出現(xiàn)了低甲基化。進而用DNA甲基化抑制劑5-雜氮胞苷(5-azaC)處理正常CD4<'+>和CD8<'+>T細胞后,穿孔素的表達都有顯著的增高,這種增高與CD4<'+>和CD8<'+>T細胞穿孔素基因啟動子區(qū)域出現(xiàn)的低甲基化有關(guān)。那么DNA高甲基化是否會使穿孔素表達下調(diào)呢?

2、 本實驗擬克隆穿孔素基因啟動子區(qū)域(PRF1),并對PRF1進行體外區(qū)域性高甲基化,為探討穿孔素基因調(diào)控序列高甲基化能否引起穿孔素表達下調(diào)奠定基礎(chǔ)。 方法:(1)以人全基因組DNA為模板,通過PCR擴增方法獲得穿孔素基因啟動子區(qū)域(PRF1)。(2)將PRF1克隆到T載體,雙酶切鑒定并測序證實:再定向亞克隆至報告基因載體pGL3-Basic中。(3)大量酶切得到目的片斷,用甲基化酶M.SssI及甲基供體S-腺苷甲硫氨酸(S

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