皮膚鱗癌中E-鈣粘素基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的研究.pdf

1、本研究的目的是研究皮膚鱗癌中E-cadherin蛋白的表達(dá)和E-cadherin基因CpG島甲基化與其mRNA表達(dá)的關(guān)系，探討E-cadherin基因甲基化在皮膚鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:采用SABC免疫組化法，檢測(cè)26例不同分化程度的皮膚鱗狀細(xì)胞癌及10例正常皮膚石蠟包埋組織標(biāo)本中的E-cadherin的表達(dá)與定位。采用圖像分析系統(tǒng)對(duì)蛋白表達(dá)進(jìn)行定量分析，比較正常對(duì)照組與不同分化程度鱗狀細(xì)胞癌之間E-cadherin

2、蛋白表達(dá)差異，分析E-cadherin蛋白在皮膚鱗狀細(xì)胞癌臨床Ⅰ期至Ⅲ期的表達(dá)差異。采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測(cè)皮膚鱗癌和正常組織中E-cadherin基因CpG島的甲基化狀態(tài)，并通過RT-PCR檢測(cè)人表皮鱗癌細(xì)胞株A431經(jīng)不同濃度去甲基化藥物5—氮胞苷處理后E-cadherin mRNA表達(dá)的差異，用MTT法觀察5—氮胞苷對(duì)細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果:正常皮膚和皮膚鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞胞漿中均表達(dá)E-cadherin。與正常

3、對(duì)照組相比，皮膚鱗癌皮損中的E-cadherin的表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05)。皮膚鱗狀細(xì)胞癌中，從Ⅰ期到Ⅲ期，E-cadherin的表達(dá)逐漸降低，Ⅲ期與Ⅰ期、Ⅱ期相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在皮膚鱗癌中E-cadherin基因的CpG島的甲基化率是34.6％(9／26)，而正常皮膚組織中是0％(0／10)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。皮膚鱗癌中E-cadherin基因甲基化與腫瘤的分化程度(P=0.031)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

4、移(P=0.011)以及患者年齡(P=0.012)有關(guān)，與性別無關(guān)(P=0.873)。經(jīng)去甲基化藥物5’一氮胞苷處理后A431腫瘤細(xì)胞E-cadherin的mRNA表達(dá)上調(diào)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。5，一氮胞苷抑制A431腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。 結(jié)論 1．與正常皮膚組織相比，皮膚鱗癌中E-cadherin蛋白表達(dá)是下調(diào)的。 2．皮膚鱗癌中E-cadherin基因CpG島甲基化率明顯高于正常組織，與腫瘤的分化程度