MMP9單核苷酸多態(tài)性與鼻咽癌遺傳易感性及MMP11表達與鼻咽癌臨床病理變化的關系研究.pdf

1、目的:通過病例-對照研究MMP9基因單核苷酸多態(tài)性(SingleNucleotidePolymorphisms，SNP)與廣東人鼻咽癌發(fā)病風險及臨床病理分期的關系；研究鼻咽癌組織中MMP11mRNA和蛋白的表達與鼻咽癌臨床病理變化和患者預后的關系。 材料與方法:提取433例鼻咽癌病例組與437例正常對照組人群外周血白細胞DNA，用PCR-酶切限制性片段長度多態(tài)(RestrictionFragmentLengthPolymorph

2、ism，RFLP)法分析C-1562T和第六外顯子R279QSNPs在病例與對照組中的分布頻率，并用SPSS11.0統(tǒng)計軟件分析MMP9基因SNP及其與吸煙交互作用與鼻咽癌發(fā)病風險的關系，及與病例組臨床病理分期的關系。應用免疫組化和原位雜交方法檢測75例鼻咽癌組織中MMP11mRNA和蛋白的表達，并分析其與各臨床病理變化之間的關系。 結果:1.MMP9多態(tài)性與鼻咽癌遺傳易感性的關系病例組吸煙人群比例(66.74％)明顯高于對照組

3、(33.19％)(x2=40.08，P＜0.001)，說明吸煙可明顯增加這一人群患病風險，經(jīng)性別和年齡校正后的OR值為4.01(95％CI=2.86-5.63)。 MMP9C-1562T多態(tài)產(chǎn)生CC、CT、TT三種基因型，CC基因型和CT+TT基因型在433例病例組分布頻率分別為78.52％和21.48％，在437例對照組分布頻率分別為78.72％和21.28％，兩組比較無顯著差異(x2=0.005，P=0.944)，未能增加鼻

4、咽癌的發(fā)病風險(-1562CT/TT基因型vs.CC基因型，OR=0.91，95％CI=0.38-2.16)。 MMP9第六外顯子R279Q多態(tài)產(chǎn)生RR、RQ、QQ三種基因型，RR基因型和RQ+QQ基因型在378例病例組分布頻率分別為57.94％和42.06％，在333例對照組分別為57.06％和42.94％，兩組比較無顯著差異(x2=0.056，P=0.813)，未能增加鼻咽癌的發(fā)病風險(279RQ/QQ基因型vs.RR基因型

5、OR=0.95，95％CI=0.50-1.79)。 MMP9C-1562T多態(tài)與R279Q多態(tài)聯(lián)合分析與鼻咽癌發(fā)病風險無關，兩組基因型單獨或聯(lián)合與吸煙增加鼻咽癌發(fā)病風險均無交互作用。鼻咽癌病例組中，-1562CT/TT和RQ/QQ基因型未表現(xiàn)出更高的T分期(經(jīng)年齡、性別和吸煙校正后的OR值分別為1.23和0.84，P＞0.05)和淋巴結轉移潛能(經(jīng)年齡、性別和吸煙校正后的OR值分別為0.88和0.68，P＞0.05)，提示MMP

6、9C-1562T多態(tài)與R279Q多態(tài)與鼻咽癌浸潤和轉移無相關性。 2.鼻咽癌組織MMP11mRNA及其蛋白表達與臨床病理變化的關系鼻咽癌組織MMP11mRNA和蛋白陽性顆粒均位于腫瘤細胞胞漿及癌巢旁的間質(zhì)纖維細胞胞漿。MMP11mRNA陽性表達率為100％，在癌細胞與纖維細胞中陽性表達率分別為97.33％(73/75)和93.33％(70/75)；MMP11蛋白陽性表達率為98.67％，在所有病例中癌細胞與纖維細胞陽性表達率分別

7、為96％(72/75)和93.33％(70/75)。MMP11mRNA和蛋白表達強度均與腫瘤大小和臨床分期顯著相關。 MMP11mRNA癌細胞強陽性組和弱陽性或陰性組3年無瘤生存率分別為81.66％和15.09％，MMP11mRNA癌細胞強陽性組的無瘤生存率顯著低于非強陽性組(Logrank分析，P=0.000)；MMP11mRNA纖維細胞表達“+”，“++”和“+++”陽性組患者的3年無瘤生存率分別為88.57％、43.89％

8、、14.03％，各組間有顯著性差異(P=0.007)，上述差異以晚期鼻咽癌病人更明顯。 癌細胞MMP11蛋白表達“+”，“++”和“+++”陽性患者的3年無瘤生存率分別為83.33％、65.55％、6.56％，各組間有顯著性差異(P=0.000)；纖維細胞表達“+”，“++”和“+++”陽性患者的3年無瘤生存率分別為75.80％、51.82％、5.75％，各組間有顯著性差異(P=0.000)；進一步分析顯示MMP11癌細胞和纖維

9、細胞表達“+++”陽性患者的3年無瘤生存率顯著低于“+”，“++”陽性患者(P值均小于0.05)。提示鼻咽癌組織中MMP11無論癌細胞還是癌旁間質(zhì)纖維細胞蛋白表達強陽性均是預后不良的標志。 鼻咽癌組織中MMP11無論癌細胞還是纖維細胞mRNA與蛋白表達呈顯著正相關(P=0.000)。多因素Cox風險回歸模型分析提示鼻咽癌癌細胞MMP11mRNA/蛋白表達水平及臨床分期是鼻咽癌獨立的預后影響因素。 結論:1.MMP9基因啟