重組腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)酪氨酸羥化酶（TH）和膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（GDNF）基因轉(zhuǎn)導(dǎo)治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、帕金森病(PD)是一種常見(jiàn)于中老年人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,其主要病理改變?yōu)楹谫|(zhì)紋狀體系多巴胺(DA)能神經(jīng)元進(jìn)行性變性死亡,紋狀體DA含量降低.由于其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確,目前的所有治療手段,包括藥物治療和各種外科手術(shù)、腦組織移植等均只限于暫時(shí)的癥狀改善,不能從根本上延緩或阻止其病程進(jìn)展.理想的PD治療方法除了要糾正其腦內(nèi)DA含量的不足,還要保護(hù)殘存的DA能神經(jīng)元.目前認(rèn)為,基因治療將可能是實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的最佳途徑.該研究采用了分子克

2、隆、細(xì)胞培養(yǎng)和腦立體定位注射技術(shù)等研究方法,分別將TH、GDNF和綠色熒光蛋白基因(GFP)構(gòu)建入重組腺相關(guān)病毒(rAAV)載體中,并分別包裝出含有三種目的基因的假病毒,即rAAV-TH、rAAV-GDNF、rAAV-GFP,通過(guò)離體細(xì)胞感染研究證實(shí)其具有明確的轉(zhuǎn)基因生物學(xué)活性后,再將其分別或聯(lián)合注射到內(nèi)側(cè)前腦束(MFB)切割損傷的PD大鼠模型腦內(nèi),以了解rAAV-TH的治療作用和rAAV-GDNF對(duì)DA神經(jīng)元的保護(hù)功能,并進(jìn)一步探索r

3、AAV-TH和rAAV-GDNF聯(lián)合移植的治療效果,以尋找PD基因治療的最佳途徑.該研究采用了rAAV載體分別或聯(lián)合轉(zhuǎn)導(dǎo)TH與GDMNF基因方法,通過(guò)對(duì)MFB切割損傷的PD大鼠模型進(jìn)行治療研究,證實(shí)了rAAV載體是一種安全、有效的CNS轉(zhuǎn)基因治療載體,其轉(zhuǎn)基因表達(dá)時(shí)間至少存在6個(gè)月以上,TH基因和GDNF基因的聯(lián)合轉(zhuǎn)染方式較單基因方式可更迅速、更有效地恢復(fù)PD大鼠的行為和腦內(nèi)DA含量,并能有效地保護(hù)黑質(zhì)DA神經(jīng)元,具有明顯的治療優(yōu)勢(shì).為